【摘 要】
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以蓝色矮牵牛(Petunia hybrida)、风信子(Hyacinthus orientalis)和葡萄风信子(Muscari botryoides)不同时期(花蕾期、初花期、盛花期)的花瓣为材料,利用RT-PCR技术就蓝色花
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以蓝色矮牵牛(Petunia hybrida)、风信子(Hyacinthus orientalis)和葡萄风信子(Muscari botryoides)不同时期(花蕾期、初花期、盛花期)的花瓣为材料,利用RT-PCR技术就蓝色花形成相关基因cDNA克隆及植物表达载体构建进行了研究,取得了以下研究结果:1.建立了适合葡萄风信子多糖组织总RNA提取的优化的CTAB法;利用RT-PCR技术从矮牵牛的蓝紫色花瓣中分离了两个控制花色的类黄酮-3’,5’-羟基化酶(F3’5’H)基因HF1(1622bp)和HF2(1677bp),同时分离了能提高类黄酮-3’,5’-羟基化酶活性的B5蛋白编码基因DifF(464bp)。2.从蓝色风信子花瓣中分别克隆得到了710bp的cDNA片段, Blastx比对结果表明分别与其它物种的类黄酮-3’,5’-羟基化酶(F3’5’H)氨基酸序列同源性较高,达40%-68%,序列相似性分析的结果初步表明分离了风信子F3’5’H cDNA片段(登录号:EF468472)3.构建了含有矮牵牛类黄酮-3’,5’-羟基化酶(F3’5’H)基因HF1的植物表达载体pWR306-HF1。
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