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目的：通过上调和下调Twist基因在人结肠癌细胞系的表达,从正反两方面探讨Twist基因调控人结肠癌细胞系发生上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)的作用及机制,并明确其对恶性肿瘤侵袭转移的影响,为进步研究结肠癌的基因治疗提供实验基础。方法：利用高表达Twist基因的重组质粒pTracer-CMV/BSD-Twist和空质粒pTracer-CMV/BSD转染Twist低表达的结肠癌HT29细胞系,杀稻瘟菌素筛选稳定转染细胞,RT-PCR和Western blot鉴定转染后Twist基因的表达是否上调。同时,利用Twist基因RNA干扰质粒pGenesil1.2-Twist-shRNA和空质粒pGenesil1.2转染Twist高表达的结肠癌HCT116细胞系,G418筛选稳定转染细胞,RT-PCR和Western blot鉴定转染后Twist基因的表达是否下调。采用RT-PCR和Westernblot检测以上两种细胞系转染前后EMT相关表型标志物(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)的mRNA和蛋白表达水平,使用Trans well迁移实验、侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果：1.质粒成功转染人结肠癌HT29和HCT116细胞系,经筛选、鉴定后获得稳定转染细胞系。2.HT29细胞系稳定转染高表达质粒后,Twist的mRNA和蛋白表达水平显著高于未转染组和转染空质粒组,差异有统计学意义(P<0.05)；HCT116细胞系稳定转染shRNA干扰质粒后,Twist的mRNA和蛋白表达水平显著低于末转染组和转染空质粒组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.上调HT29细胞系Twist基因的表达后,E-cadherin mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而N-cadherin、Vimentin mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。下调HCT116细胞系Twist基因的表达后,E-cadherin mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而N-cadheri、Vimentin mRNA及蛋白质表达水平显著降低(P<0.05)。4.上调HT29细胞系Twist基因的表达后,Transwell细胞迁移实验和侵袭实验结果均显示肿瘤细胞穿过小室膜的细胞数明显多于未转染组和空质粒组(P<0.05)。下调HCT116细胞系Twist基因的表达后,Transwell细胞迁移实验和侵袭实验结果显示肿瘤细胞穿过小室膜的细胞数明显少于未转染组和空质粒组(P<0.05)。结论：1.上调Twist基因在结肠癌细胞系HT29的表达,可以降低上皮表型标志物E-cadherin的表达水平,提高间质表型标志物N-cadherin、Vimentin的表达水平,促进肿瘤细胞EMT的发生,并增强肿瘤细胞的体外迁移和侵袭能力。2.下调Twist基因在结肠癌细胞系HCT116的表达,可以提高上皮表型标志物E-cadherin的表达水平,降低间质表型标志物N-cadherin、Vimentin的表达水平,从而逆转EMT,促进MET的发生,有效地抑制了结肠癌细胞的体外迁移和侵袭能力。3.通过RNA干扰技术可以有效地沉默结肠癌细胞系HCT116中Twist基因的表达,为今后RNA干扰技术应用于结肠癌的基因治疗提供了必要的实验依据。