大鼠80%门静脉结扎与80%肝切除对残肝再生影响的对比研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fubaoran
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目的:通过建立大鼠80%肝门静脉结扎和大鼠80%肝切除模型,观察相应门静脉结扎和肝切除对术后生存率及肝脏再生的作用及影响。方法:健康SD雄性大鼠108只,体重(220±20)g,分成3组。A组:行80%肝门静脉结扎(PVL)组;B组:行80%肝切除(PH)组;C组:为假手术(Sham)组,仅翻动肝脏各分叶。A、B、C三组每组12只,观察三组大鼠生存率。A、B、C三组分别于24h、48h、72h、120h各处死6只大鼠,检测血清ALT、AST并行肝重体重比检测;A、B两组行免疫组化法检测肝增殖细胞核抗原(PCNA)指数及采用免疫蛋白印迹法检测细胞周期蛋白Dl(CyclinD1)的蛋白表达。结果:①大鼠术后生存率:A组门静脉结扎组术后120h10只大鼠存活,术后生存率83.3%。B组肝切除组术后120h7只大鼠存活,术后生存率58.3%,与A组相比,存在显著差异(P<0.05)。C组假手术组中术后大鼠均存活,A组与C组比较(P>0.05)无统计学意义,B组与C组比较存在显著性差异(P<0.05)。②肝重体重比的变化:24h时A组肝重体重比为1.32±0.05、B组为1.48±0.03;C组为1.28±0.08,B组高于A组,有显著性差异(P<0.05);第48h、72h、120h时A组肝重体重比分别为2.11±0.10、2.52±0.09、3.28±0.07;B组分别为:1.91±0.08、2.38±0.06、3.17±0.03;C组分别为:1.32±0.07、1.36±0.05、1.38±0.02,A组均高于B组,有显著性差异(P<0.05);C组与A、B组相比,术后24h时B组显著高于C组,有显著性差异(P<0.01);术后48h、72h和120h时,A、B两组肝重体重比均显著大于C组,有显著性差异(P<0.01)。③血清ALT、AST的变化:三组术后血清ALT、AST水平均于术后24h达到高峰,并随时间的推移逐渐降低。A组和B组相比,术后24h、48h、72h时B组的ALT、AST水平高于A组(P<0.05);第120h时A组、B组两组相比无显著差异(P>0.05)。C组与A、B组相比,术后24h、48h、72h时C组ALT、AST水平均明显低于A、B两组,有显著性差异(P<0.01);第120h时C组与A、B组相比无显著差异(P>0.05)。④肝组织PCNA标记指数的变化:在24h时B组PCNA指数达到最高值为42.31±1.14、A组为22.14±2.01,B组明显高于A组,有显著性差异(P<0.01);48h时A组PCNA指数达到最高值为45.61±1.54、B组为27.48±2.13,A组明显高于B组,有显著性差异(P<0.01);72h、120h时A组PCNA指数分别为14.72±1.03、4.27±0.09;B组为11.68±1.21、3.96±0.11,A组PCNA指数均高于B组,有显著性差异(P<0.05)。⑤肝组织CyclinD1相对表达量的变化:CyclinD1在A组早期仅有轻度表达,高峰出现在术后48h,而B组高峰出现在术后24h。在24h时B组和A组CyclinD1相对表达量分别为0.58±0.09、0.21±0.05,B组CyclinD1相对表达量高于A组,有显著性差异(P<0.01);在48h时B组和A组CyclinD1相对表达量分别为0.23±0.04、0.61±0.11,A组CyclinD1相对表达量明显优于B组,有显著性差异(P<0.01);72h、120h时B组CyclinD1相对表达量分别为0.17±0.02、0.05±0.01;A组为0.25±0.03、0.09±0.02,A组CyclinD1相对表达量均高于B组,有显著性差异(P<0.05)。结论:1、大鼠80%肝门静脉结扎导致结扎肝叶进行性萎缩,未结扎肝脏代偿性增生,作为研究肝脏再生的动物模型具有制作方便,稳定可靠地特点。2、大鼠80%肝门静脉结扎较之于80%肝切除,门静脉结扎组残余肝脏细胞受损更轻微,有利于术后早期肝功能的恢复,并且促进肝脏肝细胞增殖和肝再生。3、CyclinD1的表达在肝门静脉结扎及肝切除术后的肝脏细胞增殖过程中起重要作用。4、大鼠80%肝门静脉结扎较之于80%的肝切除更有利于残余肝脏的再生,提高动物术后生存率。
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