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水牛乳每年产量约9×10~8吨,占世界牛乳产量的13%。蛋白质、脂肪、乳糖、总固体、维生素和矿物质含量高于荷斯坦牛乳。这些差异使得水牛乳的风味和口感都有利于制造各类乳制品如奶酪和酸奶等。截止2016年,中国养殖水牛超过2380万头,水牛乳产量居世界第三。与水牛乳产量不相匹配地是对水牛乳营养成分、生产特性等基础研究不足,进而无法加工高附加值、高收益地多样化水牛乳制品,水牛乳基础研究与加工技术亟待转型升级,尤其是关于不同酪蛋白亚型对水牛乳品质影响的研究尤为缺乏,因此,本研究以水牛乳蛋白多态性分析结果为依据,从水牛乳中分离并纯化出具有活性的β-酪蛋白亚型。利用圆二色光谱以及荧光光谱技术分析蛋白各亚型的二级结构,采用体外消化模型分析其在胃肠道中的消化性能;根据水解液的抗氧化活性来分析生物活性肽的释放。研究结果如下:1.高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)结果显示,160头水牛的乳蛋白多态性为:β-酪蛋白(β-casein,β-CN)有A和B两种基因多态性,其中A基因型占总量的21.50%,B基因型所占比重较大为78.50%。β-酪蛋白有AA、AB和BB三种亚型,BB型最为常见占总量的64.38%;AB亚型占28.12%;AA亚型仅占7.5%。2.酪蛋白亚型与乳成分的关联结果显示,发现β-酪蛋白为不同亚型的水牛乳的蛋白含量和脂肪含量存在显著差异(P<0.05),BB型的水牛乳蛋白含量要显著高于AA亚型,AA亚型的水牛乳脂肪含量要显著高于BB亚型。在总固、非脂以及乳糖含量上,不同蛋白亚型的水牛乳之间并无显著差异。3.β-酪蛋白的二级结构测定结果显示,三种β-酪蛋白亚型的无规则卷曲所占比重较大,其次是β-转角,最少的是α-螺旋,BB亚型除了无规则卷曲外其余含量均小于AA亚型。三种β-酪蛋白在280 nm以及295 nm激发波长下的最大发射波长以及发射强度都具有极显著差异(P<0.01)。4.β-酪蛋白的消化性能结果显示,AB亚型消化性能最快,其次为AA亚型,BB亚型最难消化。5.抗氧化性结果显示,β-酪蛋白中AA亚型的1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)清除能力要优于BB亚型;BB亚型的·OH自由基清除能力要优于AA亚型;BB亚型的还原性能力要优于AA亚型。研究结果表明,水牛乳的β-酪蛋白存在A和B两个等位基因,三种亚型(AA,AB和BB)。这三种基因型的水牛乳在乳成分等方面存在差异。β-酪蛋白的基因多态性与乳成分、蛋白质二级结构的差异密切相关、甚至造成体外消化功能和抗氧化活性的不同。这些结果可为水牛乳的定向育种、精准设计水牛乳功能性乳制品提供理论基础。