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羊口疮（Orf）又称羊传染性脓疱皮炎(Contagious pustular dermatitis,CPD)、结痂嘴（Scab mouth）是由羊口疮病毒（ORFV, orf virus）引起的一种急性、接触性、人兽共患传染病。山羊是本病的主要感染对象，初生羔羊因为免疫体统不完善更易被感染，由于羊口疮病毒具有免疫逃逸机制，因此能够反复感染山羊。随着养羊业的快速发展，羊口疮已成为影响养羊业的主要疾病之一。羊口疮研究目前存在的主要问题如下：①病原分离材料仅限于结痂和口唇病变病料；②羊口疮分子流行病学调查结果极度缺乏；③与病毒毒力和免疫逃逸相关的基因的研究还处于起步阶段，病毒免疫逃逸机制不清楚。本研究以杨凌的3个规模化养殖场的奶山羊为研究对象，采集外周抗凝血、口腔棉拭子和乳汁，采用NaI法和异硫氰酸胍法提取基因组DNA， F1L为引物进行病原学检测。以表观正常病原阳性的外周血为原料，在牛睾丸原代细胞上分离羊口疮病毒，并对病毒进行特征性细胞病变（CPE）鉴定、PCR鉴定和亲缘分析。对羊口疮病毒FX0910强毒株及该毒株人工毒力致弱的弱毒株(low virulent ORFV-FX0910,lvORFV)的ORFV-121和vIL-10基因进行生物信息学分析。获得如下试验结果：1.分子流行病学调查显示，A羊场外周抗凝血病原阳性率为21.25%，口腔棉拭子病原阳性率为25%，乳清病原阳性率为16.12%；B羊场外周抗凝血中病原阳性率为27%，口腔棉拭子病原阳性率为8.1%；C羊场外周抗凝血病原阳性率为34.23%，口腔棉拭子病原阳性率为18%，乳清病原阳性率为30.63%。2.将病原阳性抗凝血处理后接种于牛睾丸原代细胞，盲传3次后可观察到细胞病变。病毒接种牛睾丸原代细胞后可见细胞变圆、裂解、折光性增强；B2L、VIR基因PCR产物经核酸电泳分析，分别在1100bp和550bp附近出现特异性条带；亲缘分析显示该病毒与羊口疮病毒印度株和希腊株亲缘关系较近，说明该毒株为羊口疮病毒并将该毒株命名为杨凌株（ORFV-YL）。3.生物信息学分析结果显示如下：lvORFV的ORFV-121基因118位的谷氨酸缺失，说明该处发生的碱基突变为有意突变，该突变导致弱毒株相应蛋白的亲水性、二级结构发生变化，蛋白的抗原性在很多区域发生本质改变；vIL-10在氨基酸水平出现了5个氨基酸位点突变（14：V→W、49：A→P、57：T→M、72：R→C、79：I→V）和79位插入一个色氨酸。这些位点差异导致蛋白的亲水性、二级结构和抗原性发生了变化。结论：1.被调查羊场奶山羊不仅携带羊口疮病毒情况不容乐观，并且其中一些带毒羊还可通过口腔分泌液和乳汁向环境散毒，整个羊场发生羊口疮的风险较高；2.本研究首次发现羊的乳汁中存在羊口疮病毒的现象；3.本研究找到了分离羊口疮病毒的新途径和材料，促进了羊口疮病原学和流行病学研究；4.证明羊口疮强毒株和弱毒株之间存在一些基因的变异现象。