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背景结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是消化道最常见的肿瘤之一,其发病率和死亡率呈逐年上升趋势,严重威胁着人类健康。目前广泛采用AJCC/UICC的TNM分期是判断CRC预后主要依据,但临床病理分期不足以预测Ⅱ期CRC复发转移风险。尽管Ⅱ期CRC处于疾病中早期,但预后差异很大,约20%的患者术后出现复发转移。研究Ⅱ期CRC患者复发转移的高危因素及相关分子标记物可以补充分期系统的不足,并对基于肿瘤个体生物学特征的治疗提供理论依据。β-半乳糖苷凝集素-3(galectin-3)被称为肿瘤相关蛋白,参与调节肿瘤细胞生长、凋亡、黏附、血管生成和肿瘤侵袭转移等过程,在CRC发生发展中扮演重要角色。我们既往研究得出通过使用galectin-3配体的竞争性抑制剂低分子柑橘果胶(Low-Molecular-Weight Citrus Pectin,LCP),封闭肿瘤细胞表面的galectin-3位点,在体内、体外实验中可以达到抗肿瘤及抑制转移的目的。galectin-3参与肿瘤的侵袭转移可能与细胞-细胞和细胞-基质之间粘附、血管生成等机制有关,但其在CRC复发转移中的具体作用尚不清楚,而且目前尚无关于galectin-3与Ⅱ期CRC复发转移相关性的临床研究。肿瘤侵袭转移涉及多种机制,其中上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)是肿瘤发生侵袭转移的早期事件被受到广泛关注。EMT发生时细胞形态改变,细胞间连接破坏,细胞获得迁移能力,促使肿瘤细胞侵袭转移。Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因的激活可以引起EMT,而galectin-3在调节Wnt/β-catenin信号通路中有重要作用,对于galectin-3与EMT在CRC复发转移中的作用及其之间的关系尚不清楚,galectin-3是否可以通过调节Wnt/β-catenin通路间接影响EMT还需进一步证实。本实验旨在通过高通量方法研究影响Ⅱ期CRC复发转移的因素,探索galectin-3与EMT在Ⅱ期CRC复发转移中的作用及其潜在临床意义,进一步阐明Ⅱ期CRC复发转移过程中的分子机制,以帮助筛选Ⅱ期CRC高危因素的患者,为寻找结直肠癌诊断治疗新靶点提供理论依据,并指导临床个体化治疗。目的分析galectin-3、E-cadherin、vimentin在Ⅱ期CRC组织中的表达情况、临床意义及判断复发转移和预后的预测作用。探讨影响Ⅱ期CRC复发转移及预后的临床病理因素。研究galectin-3与E-cadherin、vimentin表达相关性,初步探索galectin-3与EMT在Ⅱ期CRC复发转移中的关系。方法按照实验入组要求,收集2004年1月-2008年12月在广州医学院附属肿瘤医院行根治术的Ⅱ期CRC患者肿瘤组织石蜡标本129例制作组织芯片,另外选取8例2011年1月至2011年11月在广州医学院附属肿瘤医院行结直肠癌根治术的Ⅱ期结直肠癌患者的肿瘤组织及配对正常组织石蜡标本作为对照。采用免疫组化技术检测galectin-3、E-cadherin、vimentin的表达情况,应用SPSS13.0统计软件对实验结果进行统计分析。各分子表达量与临床病理参数的关系采用卡方检验,理论频数<5者,进行Fisher确切概率法;各分子表达量及临床病理参数与复发转移的关系采用卡方检验,单因素分析有意义的变量进一步采用多因素Logistic回归分析;galectin-3与E-cadherin、vimentin的相关性采用Spearman等级相关系数分析;结直肠癌组织与其配对正常大肠组织之间的表达差异采用配对样本的Wilcoxon符号秩检验;应用Kaplan-Meier法进行单变量生存分析,绘制生存曲线;各因素水平间比较用Log–rank分析;预后相关因素使用Cox回归模型分析,单因素分析有意义的采用Backword:LR方式引入Cox多因素回归模型分析;以α=0.05(双侧)为标准,以P<0.05为有统计学意义。结果1、Galectin-3主要表达于细胞浆,表达率为81.2%,其表达量与肿瘤最大径、分化程度、术前血清CEA水平有关(P<0.05),肿瘤直径越大、分化越差、术前CEA水平越高galectin-3表达量越高.。2、E-cadherin在癌旁正常组织主要表达于细胞膜,在肿瘤组织中呈胞浆表达或浆、膜混合表达,肿瘤组织中其表达率为44.4%,其表达量与分化程度(P<0.05)有关,分化越好E-cadherin表达量越高。3、Vimentin表达于细胞间质,表达率为76.1%,其表达量与T分期有关(P<0.05),vimentinT4分期表达量高于T3分期。4、单因素卡方检验显示复发转移与肿瘤部位、送检淋巴结数目、T分期、术后是否辅助化疗、术前血清CEA水平、galectin-3及vimentin表达量有关。多因素分析显示复发转移与术前血清CEA水平、送检淋巴结数目、galectin-3表达量有关(P<0.05)。5、Cox单因素回归模型分析得出预后与肿瘤部位、肿瘤最大直径、送检淋巴结数目、T分期、术前血清CEA水平,术后是否辅助化疗、galectin-3及vimentin表达量有关。多因素分析显示预后与术前血清CEA水平、T分期有关(P<0.05)。6、肿瘤组织中galectin-3与E-cadherin的表达呈负相关性(r=-0.218,P=0.018),galectin-3与vimentin的表达不相关(r=0.172,P=0.064)。7、Galectin-3及vimentin在肿瘤组织的表达量高于配对正常组织,E-cadherin在肿瘤组织的表达量低于配对正常组织。结论1、在Ⅱ期CRC组织中galectin-3表达上调与肿瘤最大径、分化程度、术前血清CEA水平、复发转移有关,并提示预后不良,galectin-3可能作为Ⅱ期CRC复发转移的分子标志物。2、细胞间质中vimentin表达上调对Ⅱ期CRC复发转移和预后不良有提示作用。