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为了维持膜蛋白和分泌蛋白的稳态,真核细胞利用内质网相关的蛋白质质量监控机制(ERQC)来监控蛋白质的折叠状态。如果一个蛋白质在给定的时间内不能获得它正确的蛋白结构,它会经过错误折叠蛋白识别、泛素化修饰、转运出内质网然后被26S蛋白酶体降解的过程,这个过程称为内质网相关的蛋白质降解(ERAD)过程。我的学位论文的中心目的是研究内质网定位的α1,2-甘露糖苷酶/分子伴侣在控制内质网滞留的油菜素内酯受体BRI1的突变形式bri1-5蛋白的折叠和降解过程的生化功能。 论文的第一章对于内质网相关的蛋白质质量监控机制已有的研究进行了介绍,特别是依赖N-glycan信号的ERQC机制。同时我也讨论了我开展的研究课题的可行性。 论文的第二章详细描述了我博士论文的主要工作,主要研究了拟南芥的α1,2-甘露糖苷酶AtERManⅠ,AtEDEM1和AtEDEM2的生化功能。我的研究显示AtEDEM2是一个只针对错误折叠蛋白的双重功能α1,2-甘露糖苷酶,既可以和AtERManⅠ共同作用切除折叠错误不能修复的糖蛋白的Man9GlcNAc2的B链末端的α1,2-甘露糖残基,又可以和AtEDEM1功能冗余地切除Man8GlcNAc2的C链的α1,2-甘露糖残基。同时我推测AtEDEM2可能作为一个蛋白折叠感受器,可以从折叠中间体或者可以修复的错误折叠蛋白中将最终折叠错误而不能修复的糖蛋白识别出来并启动ERAD过程。 论文的第三章对鉴定蛋白质二硫键异构酶PDI5/6是错误折叠的bri1-5的互作蛋白进行了描述。PDI5和bri1-5的互作通过蛋白免疫共沉淀和双分子荧光实验进行了验证。过表达PDI5/6可以增强bri1-5的矮化表型并降低bri1-5的蛋白量,暗示了两个PDIs可能参与bri1-5蛋白的降解。奇怪的是,PDI蛋白增强bri1-5矮化表型不需要活性必需的典型的CXXC基序,而依赖参与结合ERAD机器其他组分的b结构域。 论文的第四章对毕业论文的主要发现进行了总结,并提出了对研究ERAD系统中未解决问题的展望。