【摘 要】
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PNMA家族(Paraneoplastic Ma)先前报道为一类与神经系统调控相关的蛋白,包含 Pnma1、Pnma2、Pnma3、Pnma4(Moap1)、Pnma5 和 Pnma6A 六个成员,在成人脑组织中均有较高表达丰
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PNMA家族(Paraneoplastic Ma)先前报道为一类与神经系统调控相关的蛋白,包含 Pnma1、Pnma2、Pnma3、Pnma4(Moap1)、Pnma5 和 Pnma6A 六个成员,在成人脑组织中均有较高表达丰度。已有研究发现,除Pnma5外,其它成员在参与副肿瘤性脑神经功能障碍疾病(Pnma1-3),调节死亡受体依赖的细胞凋亡(Pnma1、Pnma4)、诱导肿瘤发生(Pnma2)等方面发挥作用。根据全基因组研究分析推测,Pnma5可能为一种重要的雌性生育力因子,目前在生殖系统及减数分裂中的功能研究尚不清楚。我们以体外成熟的小鼠卵母细胞为研究模型,初步结果显示,与同家族成员相比较,Pnma5在卵母细胞中呈明显优势表达,且表达丰度显著高于颗粒细胞,提示Pnma5在调控减数分裂进程中发挥重要功能。运用特异性siRNA转染有效干扰Pnma5表达,研究结果提示Pnma5敲降导致卵母细胞成熟障碍、减数分裂进程延迟,纺锤体装配及转位异常,后期染色体分离障碍及非整倍体数增加等。体外受精实验表明,Pnma5敲降后卵母细胞受精率显著下降。近一步探究发现,Pnma5沉默影响纺锤体微管的稳定性和actin-cap(皮质微丝帽)区域F-actin(肌动蛋白丝)的组装,Pnma5敲降引起线粒体异常聚集及ATP水平降低。另外,我们检测到Pnma5序列第553位的苏氨酸磷酸化位点,其磷酸化形式p-Pnma5在卵母细胞皮质区和纺锤体高度富集。研究发现Pnma5通过磷酸化作用调控下游p-Akt和p-Gsk3 β,同时Pnma5磷酸化水平受磷酸化Src-Erk1/2通路调节,提示p-Pnma5为活性形式,激活下游Akt/Gsk3 β信号通路。综上表明,Pnma5通过磷酸化作用参与Src→Erk1/2→Pnma5→Akt→Gsk3 β信号通路调控小鼠卵母细胞减数分裂进程。
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