目的：研究23-羟基白桦酸衍生物B5G9对人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用及其诱导死亡的机制。方法：采用MTT法评价23-羟基白桦酸衍生物对人肝癌细胞系HepG2、HepG2/ADM、Hep3B和Bel-7402的增殖抑制活性，Hochest33258染色检测细胞凋亡时细胞核染色质的变化，透射电子显微镜观察细胞亚显微结构的变化，采用流式细胞仪分析B5G9对细胞周期的影响，Annexin V-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率，JC-1染色观察B5G9对细胞线粒体膜电位的影响，Western blot检测相关凋亡蛋白caspase-8，caspase-9，caspase-3和PARP的剪切情况、线粒体调控蛋白Bcl-2、Bax的表达水平的变化以及cytochrome c的释放。采用荧光探针H2DCFDA、Fluo-3-AM检测胞浆中ROS含量和钙离子浓度。结果：23-羟基白桦酸衍生物B5G9能有效地抑制人肝癌细胞系HepG2、HepG2/ADM、Hep3B和Bel-7402的增殖并呈剂量依赖性抑制HepG2的增殖。细胞周期分析结果显示B5G9诱导HepG2细胞产生DNA含量减少的亚二倍体凋亡峰，并呈剂量依赖性。线粒体膜电位检测发现B5G9呈剂量依赖性下调HepG2细胞的线粒体膜电位。Western blot结果显示B5G9作用后，caspase-9，caspase-3和PARP被剪切活化，cytochrome c释放到胞浆，但caspase-8、Bcl-2和Bax的表达水平无明显变化。B5G9作用后，细胞内ROS和钙离子水平显著增加，NAC的加入抑制了二者的释放，增加了细胞存活，减少了细胞凋亡和线粒体损伤。PT孔抑制剂MgCl2减少了了B5G9诱导的凋亡和线粒体损伤。结论：B5G9可以抑制人肝癌细胞HepG2增殖并诱导其凋亡，作用机制可能与ROS介导的线粒体凋亡途径相关。