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本研究旨在揭示荷叶内生真菌的多样性及筛选可利用菌株,可丰富内生真菌资源,为内生真菌与宿主植物、环境之间的关系研究奠定基础,也对进一步研发荷叶内生真菌生产药物成分和生物酶有重要意义。采用组织分离法进行分离、纯化,得到323株荷叶内生真菌,其中4、5、6、7、8、9、10月份的荷叶内生真菌菌株数分别为9株、51株、55株、63株、43株、45株、57株。通过菌落形态特征、显微观察和真菌rDNA-ITS序列分析,将所得菌株归为17个属,其中Colletotrichum sp.为优势属,相对频率为 21.05%,Annulohypoxylon nitens sp.和Diaporthales sp.相对较多,相对频率分别为18.58%和8.05%。在4、5、6、7、8、9、10月份中,荷叶内生真菌的菌属数目分别为2、12、15、15、12、11、12;7月份的分离率最大(35%),4月份的最小(5%);Shannon-Wiener多样性指数呈现出一定的规律性:4月份(0.53)<5月份(2.28)<6月份(2,45)>7月份(2.42)>8 月份(2.32)>9 月份(2.15)>10 月份(1.81)。通过筛选分离得到一批有价值的荷叶内生真菌,其中一株能够产黄酮类物质的Aspergillusaculeatus HY1,经采用硝酸铝显色法测得干菌体总黄酮含量为8.20mg/g;一株产果胶酶的Colletotrichum sp.HY2,经DNS法测得样品液中的果胶酶酶活为62.90 U/mL;两株产纤维素酶的荷叶内生真菌,使用DNS法测定酶活力,Rhodosposporidiobolus sp.HY3的内切葡聚糖酶酶活为44.46 U/mL、外切葡聚糖酶酶活为5.80 U/mL、滤纸酶活为为12.04 U/mL;Colletotrichum sp.HY4的内切葡聚糖酶酶活为28.23U/mL、外切葡聚糖酶酶活为7.82 U/mL、滤纸酶活为13.52 U/mL。本研究首次分析了荷叶内生真菌的多样性,并筛选得到一株产黄酮类化合物、一株产果胶酶、两株产纤维素酶的荷叶内生真菌,在一定程度上丰富了内生真菌资源、说明了环境对内生真菌侵染荷叶的影响,而且对荷叶内生真菌的应用及药物开发具有重要意义。