新西兰兔动物模型3种尿道下裂成形术新尿道组织学和超微结构研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiandancaozuo
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目的:通过建立新西兰兔急性损伤型尿道下裂动物模型,研究尿道板切开卷管尿道成形术(TIPU)、尿道口基底皮瓣翻转成形术(Mathieu)及加盖岛状皮瓣尿道成形术(Onlay)3种保留尿道板尿道成形术(CUPU)术后新尿道大体形态、组织超微结构特点,给临床手术决策提供科学实验依据。方法:随机将16只雄性新西兰兔分为对照组(n=4)和干预组(n=12),其中干预组分为TIPU组、Mathieu组及Onlay组,每组4只。干预组切除部分尿道组织,形成急性损伤型尿道下裂动物模型,然后应用TIPU、Mathieu和Onlay 3种术式进行尿道成形。术后2周观察伤口愈合情况,然后处死动物,取新尿道组织行苏木精一伊红(HE)染色和马松(Masson)三色染色了解不同术式镜下一般形态差异,同时行免疫组化实验检测波形蛋白(Vimentin)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达了解组织纤维化程度,并通过透射电镜观察超微结构特点。对照组不做干预措施,直接取腹侧尿道组织行上述实验。本研究通过Image-Pro Plus 6.0软件计算免疫组化阳性表达结果,其他数据采用SPSS 25.0统计软件进行分析处理,以P<0.05为差别具有统计学意义。结果:(1)尿道下裂动物模型建立:成功通过外科手术建立急性损伤型尿道下裂动物模型新西兰兔12只;(2)三种CUPU术后2周新尿道大体观察:TIPU组和Mathieu组尿道外观与正常相似,呈粉红色,瘢痕较少;Onlay组的尿道瘢痕增生较严重,颜色灰暗,局部血运欠佳。(3)组织学检测和透射电镜观察:HE染色和Masson染色可见TIPU组胶原纤维排列稍乱,总体接近对照组,粘膜下微血管数量增多;Mathieu组纤维排列紊乱,炎性细胞浸润较严重,有部分未成熟胶原纤维形成;Onlay组炎性细胞浸润严重,胶原纤维增多变密,排列紊乱。免疫组化分析提示Vimentin在TIPU组的表达显著低于Mathieu组和Onlay组(P<0.05),在Mathieu组和Onlay组的表达未见明显差异(P=0.387);TGF-β1在TIPU组的表达显著低于Mathieu组和Onlay组(P<0.05),在Mathieu组的表达也显著低于Onlay组(P=0.031)。透射电镜观察发现TIPU组可见成纤维细胞连接消失,与周围细胞脱离,并有凋亡小体的形成;Mathieu组细胞的内质网增多,合成、分泌活动旺盛;Onlay组可见细胞自噬活动增强。结论:(1)通过外科手术成功构建兔尿道下裂动物模型;(2)不同来源的组织之间愈合现象存在差异,因此在同样的解剖条件下的轻中度尿道下裂,应尽量使用单一组织来源材料成形尿道;(3)TIPU术成形尿道的组织来源单一,符合正常尿道的结构层次,术后新尿道愈合良好、胶原纤维排列较整齐、Vimentin和TGF-β1表达低、成纤维细胞出现凋亡现象,建议首选该术式;(4)但有些病例无法仅通过一种组织成形尿道,此时建议使用Mathieu术或Onlay术。
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