第一部分 转化生长因子β受体Ⅱ(TβR Ⅱ)cDNA的克隆:目的 为构建转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)基因重组表达载体克隆TβRⅡ cDNA.结论从人胚胎肝脏中可以获得用于基因重组的结构正常的TβRⅡ基因片断.第二部 分构建转化生长因子β受体Ⅱ基因与质粒pAdtrack-CMV重组体目的 构建真核表达质粒载体pAdtrack-CMV/TβRⅡ重组体.结论 在克隆目的基因过程中使用带有不同的双酶切位点引物,扩增产物(目的基因)能够通过酶切而获得不同的粘性末端,避免自身环化,增加重组反应的效率和特异性.第三部分 重组质粒pAdtrack-CMV/TβRⅡ的鉴定和扩增 目的 鉴别出转入TβRⅡ基因重组体质粒的DH5α大肠杆菌,并在大肠杆菌中大量扩增获得的重组质粒pAdtrack-CMV/TβRⅡDNA.结论 利用质粒pAdtrack-CMV自身携带耐药kan基因的特性可以鉴定出含有重组质粒的细菌,并通过细菌的对数增长而获得高浓度、高纯度的pAdtrack-CMV/TβPⅡ真核重组表达质粒.第四部分 重组真核表达质粒pAdtrack-CMV/TβRⅡ在卵巢癌细胞系A2780和AD4中的检测 目的检测TβRⅡ蛋白在转基因和未转基因的卵巢癌细胞系A2780和AD4中的表达.结论 TβRⅡ基因重组体的转入使卵巢癌细胞系A2780和AD4的TβRⅡ蛋白表达显著性增加.第五部分TβRⅡ基因转染细胞诱导转化生长因子β1抑制A2780和AD4细胞生长的研究 目的 探讨TβRⅡ基因重组体对转化生长因子β1(TGF-)在卵巢癌细胞系A2780和AD4生长抑制作用上的影响.结论 A2780细胞经转基因处理后,对TGF-β1的生长抑制作用敏感性显著性增强.对顺铂耐药的AD4细胞没有作用.