目的:猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种重要的人猪共患病原菌,可导致非可逆性脑膜炎、休克,甚至猝死。中性粒细胞,也被称为多形核白细胞(Polymorphonuclear,PMN),作为防御细菌性感染的第一道防线,在细菌性脑膜炎中发挥重要作用。核糖体蛋白SA(Ribosomal protein SA,RPSA)作为细胞表面受体,在病原体粘附到宿主细胞的过程中发挥重要作用。本课题组前期研究发现SS2诱发脑膜炎时,小鼠脑组织内中性粒细胞浸润增多及中性粒细胞表面RPSA表达增加。因此,本研究旨在探究RPSA阳性中性粒细胞在SS2诱发脑膜炎过程中的功能及对血脑屏障(Blood Brain Barrier,BBB)的影响。方法:本研究首先选用C57BL/6小鼠进行SS2感染试验,通过流式细胞术分析小鼠脑组织中性粒细胞、RPSA阳性中性粒细胞的的表达量,平板菌落计数法计数脑组织载菌量;体外分离小鼠骨髓中性粒细胞,通过流式细胞术、激光共聚焦显微镜、qPCR进行体外RPSA阳性中性粒细胞的验证;通过流式细胞术、免疫荧光显微镜、qPCR分析PMN RPSA~+与PMN RPSA~-的功能,包括吞噬能力、中性粒细胞胞外诱捕网(NET)形成及分泌细胞因子IL-6、TNF-α情况;通过人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)单细胞模型、qPCR检测PMN RPSA~+对血脑屏障的作用;最后早幼粒白血病细胞系(HL-60细胞)诱导为类中性粒细胞,验证类中性粒细胞上RPSA的表达。结果:(1)体内动物实验证实SS2感染C57BL/6小鼠后,脑组织中性粒细胞浸润增多,且RPSA阳性中性粒细胞表达明显增多、脑组织载菌量呈现先升高后降低的趋势;(2)SS2感染体外分离的小鼠骨髓中性粒细胞和HL-60细胞系诱导的类中性粒细胞,进一步证明SS2可诱导PMN上RPSA表达增多;(3)分析PMN RPSA~+与PMN RPSA~-的功能区别,结果显示:PMN RPSA~+吞噬功能较PMN RPSA~-强,抗体封闭RPSA后,两类细胞的吞噬能力无改变,同时,PMN RPSA~+形成NET能力较PMN RPSA~-强,但PMN RPSA~+分泌TNF-α、IL-6等促炎因子的能力较PMN RPSA~-弱;(4)血脑屏障模型结果表明:PMN可破坏血脑屏障完整性,而PMN RPSA~+可加剧血脑屏障完整性的破坏,跨内皮细胞电阻(TEER)值下降,通透性升高,破坏紧密连接相关膜蛋白表达,此外,抗体封闭RPSA后,血脑屏障TEER值回升,血脑屏障通透性降低,进一步说明RPSA表达的中性粒细胞可加剧血脑屏障的破坏。结论:(1)SS2感染诱发脑膜炎时导致RPSA阳性中性粒细胞表达增高;(2)RPSA阳性中性粒细胞吞噬杀菌能力增强;(3)RPSA阳性中性粒细胞加剧血脑屏障完整性的破坏,抑制RPSA表达可能作为SS2性脑膜炎的治疗潜在靶点。