论文部分内容阅读
目的：探讨在髋关节持续脱位以及实施闭合复位干预措施后，动态观察发育性髋关节脱位（DDH）股骨头关节软骨细胞是否出现异常细胞凋亡和氧化应激，并通过检测软骨细胞内Caspase-3、NF-κB和8-OHdG的表达情况，揭示持续髋脱位与闭合复位髋关节后，股骨头关节软骨病理改变与异常细胞凋亡和氧化应激之间是否存在关联性。 方法：新西兰大耳白兔60只，雌雄不限，月龄4W，体重（0.5±0.05）kg，采用兔后肢屈髋伸膝位管型石膏固定方法制作DDH模型。将实验用动物左后肢管型石膏固定为实验侧，右后肢不做处理为对照侧。石膏固定术前、术后8W分别摄X线片，根据髋臼指数，Shenton线等方法判定是否脱位成功。将固定8W后经X线证实存在髋脱位的大耳白兔随机分为3组，固定8W组立即处死；持续脱位组继续固定，在2W后处死；闭合复位组解除固定并实施闭合复位髋关节（X线片证实复位成功）后2W处死，处死后均获取实验侧及对照侧股骨头软骨组织标本。标本取出后立即行固定、脱钙、石蜡包埋、连续切片等常规程序，制作成5μm标本待检。HE染色观察股骨头关节软骨细胞病理变化，TUNEL法检测细胞凋亡率、免疫组化S-P法检测细胞内Caspase-3、NF-κB和8-OHdG表达情况。 结果：1、固定8W组及持续脱位组实验侧X线显示髋臼指数较对照侧明显增大（P＜0.05），闭合复位组实验侧髋臼指数较复位前有所降低，但仍大于对照组（P＜0.05）。2、固定8W组股骨头关节软骨细胞稀疏，排列混乱，细胞凋亡率高于对照侧（P＜0.05）；持续脱位组实验侧股骨头关节软骨细胞更加稀疏，排列更加混乱，细胞凋亡率高于对照侧（P＜0.05）；固定8W组及持续脱位组实验侧过度细胞凋亡均与Caspase-3、NF-κB高表达呈正相关，同时均出现实验侧氧化应激标志因子8-OHdG较对照侧高表达。3、闭合复位组实验侧股骨头关节软骨依然排列混乱，大小不均，与对照侧相比可见软骨细胞轻微肿胀。闭合复位组实验侧股骨头关节软骨细胞凋亡率较持续脱位组实验侧股骨头关节软骨细胞凋亡率有所降低，但与对照组相比较，仍然存在过度细胞凋亡现象（P＜0.05）。闭合复位组实验侧氧化应激标志因子8-OhdG的表达较持续脱位组实验侧的表达有所降低，但与对照侧相比，仍然存在高表达现象。4、持续脱位组与闭合复位组的实验侧股骨头关节软骨过度细胞凋亡与氧化应激表达升高存在关联性；闭合复位髋关节可有效降低过度细胞凋亡和氧化应激的高表达。 结论：本研究表明，DDH髋关节脱位后股骨头关节软骨中存在过度的细胞凋亡及氧化应激的高表达。DDH持续髋关节脱位后股骨头关节软骨细胞发育不良可能与软骨组织内存在过度细胞凋亡及氧化应激高表达有关联性，但是相互之间的因果关系有待研究。在实验观察期间内，闭合复位髋关节这项干预措施可一定程度上降低股骨头关节软骨内过度细胞凋亡及氧化应激的高表达，并且相互之间因果关系明确。