纳米药物在抗肿瘤方面具有巨大的应用潜力,然而当前纳米药物所用载体的免疫原性,结构设计的复杂性,组成的不确定性所导致的质量不可控性,以及纳米药物在体内递送的低效性等问题,严重制约了纳米药物疗效的发挥及其临床转化的可能性,使纳米药物的发展进入了瓶颈期。如何把质量可控、安全有效的纳米药物运输到肿瘤内部使其发挥作用是一个亟待解决的问题,而粒径作为一个重要的参数对于纳米药物在体内的递送会产生重要的影响。本课题针对以上问题设计了 一个两性离子EK9肽（KEKDCDEKE）,并通过酸敏感的酰腙键偶联化疗药物阿霉素（DOX）,自组装形成不同粒径的纳米胶束,并对其药物递送过程及抗肿瘤效果进行研究,具体研究内容如下:（1）载药胶束的制备及粒径控制。合成自组装单体EK9-BMPH-DOX,通过核磁共振氢谱和傅里叶红外光谱等对上述物质进行结构表征。将溶解在去离子水中的EK9-BMPH-DOX逐滴滴加到不断搅拌的碱性水溶液中（pH 9）完成胶束的自组装。控制EK9-BMPH-DOX的组装浓度制备出一系列不同粒径的载药胶束,从中选取 EK9D-30（30 nm）、EK9D-60（60 nm）和 EK9D-90（90 nm）三个不同粒径的载药胶束完成后续研究。（2）载药胶束的长效循环研究。在体外分别测定了 EK9D-30、EK9D-60和EK9D-90的临界胶束浓度,较小的临界胶束浓度能够保证载药胶束的结构稳定性;通过检测载药胶束在PBS、牛血清蛋白和人血纤维蛋白原溶液中粒径随时间的变化情况评估EK9肽偶联阿霉素胶束的抗非特异性吸附的性能;通过载药胶束与巨噬细胞RAW 264.7共培养来检测其抗免疫系统识别清除的能力。上述性质对于载药胶束在体内长效循环起到了关键作用。此外,通过体内的药物血浆清除实验发现EK9肽偶联阿霉素胶束的长效循环能力与其粒径成正相关。（3）载药胶束的肿瘤细胞内化及药物释放研究。Zeta电位表征表明三种EK9肽偶联阿霉素胶束具有相近的等电点,均在6.6左右,接近于肿瘤微环境的pH值。体外药物释放实验结果表明EK9肽偶联阿霉素胶束的释药行为与粒径大小及外部环境的pH密切相关。探究神经胶质瘤细胞U87在pH 6.7/pH 7.4条件下对三种EK9肽偶联阿霉素胶束的内吞能力、药物进入细胞核的能力及其采用的内吞方式,结果表明三种载药胶束进入细胞及细胞核的能力不仅具有pH依赖性,与其粒径大小也密切相关,粒径越小,越有利于细胞的内吞、药物的释放与入核,与体外药物释放实验结果相符,而药物的内吞方式则主要取决于粒径大小。（4）载药胶束在肿瘤部位富集及渗透能力研究。通过活体成像系统及组织匀浆法探究三种EK9肽偶联阿霉素胶束的肿瘤靶向富集能力及渗透能力,并分析粒径对于载药胶束在肿瘤部位的富集和渗透的影响。结果表明,粒径最小的EK9D-30具有较好的肿瘤靶向能力,但滞留能力较弱;EK9D-90在肿瘤部位滞留的能力较强,但肿瘤渗透能力较弱;EK9D-60能够集二者优势于一身,具有较好的肿瘤靶向富集能力及滞留能力。（5）载药胶束的肿瘤抑制效果。测定了三种EK9肽偶联阿霉素胶束在体外不同pH条件下抑制肿瘤细胞增殖的能力,并在体内对肿瘤靶向能力较强的EK9D-30和EK9D-60进行了抑瘤实验。体内外实验结果表明,EK9肽偶联阿霉素胶束能够在降低对正常组织细胞的毒性作用的条件下有效抑制肿瘤的生长,并且粒径处于中间大小的EK9D-60具有最佳的抑瘤效果。组织病理分析表明,EK9肽偶联阿霉素胶束靶向到达肿瘤部位后能够引起肿瘤细胞凋亡程序的启动,同时对裸鼠其它脏器不产生毒害作用。本论文为结构简单、质量可控、便于临床转化的两性离子多肽抗肿瘤纳米药物的设计提供了参考。