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本论文研究灰树花子实体多糖的降血糖活性,并从细胞及分子水平深入研究其作用机制。通过8周高脂饮食和链脲佐菌素(STZ)注射建立2型糖尿病小鼠模型,研究灰树花子实体多糖对2型糖尿病小鼠模型的治疗作用;另外,从缓解胰岛素抵抗和胰岛细胞保护两个方面进行降血糖作用机理的研究。主要研究内容及结果如下: 1、灰树花子实体多糖对实验性2型糖尿病小鼠模型的治疗作用。取昆明种小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、灰树花多糖低剂量(150mg/kg)组、灰树花多糖高剂量(450mg/kg)组。正常对照组用普通饲料喂养;模型对照组、灰树花多糖给药组小鼠用高脂饲料喂养,连续喂养8周,并于第4周末注射STZ。每周检测小鼠的空腹血糖和体重,每天记录小鼠的摄食量和饮水量。结果显示模型对照组相比空白对照组小鼠的血糖和饮水量明显升高,表明2型糖尿病小鼠模型成功建立。实验第五周末,给药组小鼠开始每天灌胃给予灰树花子实体多糖450mg/kg、150mg/kg,连续给药3周。检测各组小鼠葡萄糖耐量、糖化血清蛋白、肝糖原、血脂、血清胰岛素水平等指标,胰腺组织形态显微观察。结果显示,模型对照组与给药组小鼠的体重和摄食量没有显著差别,表明灰树花子实体多糖对小鼠的体重和摄食量没有显著的影响;灰树花多糖给药组相比模型对照组小鼠饮水量、空腹血糖、糖化血清蛋白、血脂水平明显下降,肝糖原含量明显升高,表明灰树花多糖具有缓解糖尿病症状的作用;灰树花多糖给药组小鼠灌葡萄糖45min、90min后,体内血糖含量明显低于模型对照组,表明灰树花多糖可提高小鼠葡萄糖耐量的能力;病理组织学观察显示灰树花多糖给药可使胰腺组织的破坏程度明显改善,具有胰腺细胞保护作用。 2、研究灰树花子实体多糖缓解胰岛素抵抗的分子机理。检测灰树花子实体多糖对胰岛素抵抗相关基因表达的影响。胰岛素抵抗相关基因为胰岛素受体(insulin receptor,InsR)、胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)、葡萄糖转运体-4(glucose transporter4,GluT-4)基因。实验结果显示,给药组的胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物(IRS-1、IRS-2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、葡萄糖转运体-4(GluT-4)的基因表达量明显高于模型组,显示灰树花多糖具有上调胰岛素受体相关基因的表达,从而达到提高胰岛素受体敏感性、缓解胰岛素抵抗、治疗2-型糖尿病的作用。 3、研究灰树花子实体多糖对胰岛细胞保护的机制途径。首先,研究灰树花多糖对细胞凋亡相关基因影响的作用机理,胰岛细胞凋亡相关基因为蛋白激酶 B(protein kinase B,PKB,亦称Akt)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2共沉淀的蛋白质(Bcl-2 associated X protein,Bax),结果表明,给药组胰腺Akt、Bcl-2基因相比模型对照组表达量显著增加,Bax的表达量显著降低,说明灰树花子实体多糖能调节胰腺组织细胞凋亡基因Akt、Bcl-2、Bax的表达。其次,研究灰树花子实体多糖通过抗氧化作用保护胰岛细胞的作用机制。测定各组小鼠肝组织抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,结果表明,灰树花多糖给药组MDA含量明显低于模型对照组,SOD含量明显高于模型对照组,说明灰树花子实体多糖具有明显抗脂质过氧化、增加抗氧化酶活性的作用。最后,研究灰树花子实体多糖对胰岛NIT-1细胞的保护作用,采用STZ诱导损伤胰岛NIT-1细胞模型,结果表明灰树花子实体多糖可以显著提高STZ损伤的胰岛NIT-1细胞活性,改善NIT-1细胞的胰岛素分泌,并通过显微观察发现其对STZ所致的胰岛NIT-1细胞损伤具有保护细胞完整性的作用,说明灰树花子实体多糖具有保护STZ诱导损伤胰岛NIT-1细胞的作用。 综上所述,灰树花子实体多糖对2型糖尿病小鼠具有改善糖尿病症状、降血糖和降血脂的作用,作用机理与改善胰岛素抵抗、抗氧化、保护胰岛细胞、调节胰岛素抵抗相关基因和细胞凋亡相关基因的表达量有关。