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穴位贴敷是中医传统外治法的一种独特疗法,它是以中医经络学说为理论依据,把中草药研成粉末,用水、醋、酒、蜂蜜、植物油、凡士林、药液等介质将中药粉末调成糊状,再直接贴到穴位或患处,用来防治疾病的一种无创痛穴位疗法。中医理论认为经络具有联系脏腑,沟通内外,运行气血,营养全身的作用,将药物直接贴敷在穴位上,不仅能够刺激穴位激发经络之气,还可以使药效通过经络到达脏腑起到治疗疾病的目的[1]。临床上已经证实穴位贴敷可以有效降低患者血尿酸(SUA)水平,从而防治高尿酸血症(HUA)。课题组成员前期做过针刺俞、募、原穴干预HUA模型大鼠的实验研究,结果发现,针刺俞、募、原穴能不同程度降低大鼠SUA水平。但考虑到临床上患者针刺治疗的医从性较差,故在前期研究基础上,发挥中医外治法的优势,采用穴位贴敷的方法干预HUA模型大鼠肝脾肾的俞募穴,评价其治疗效果并初步探讨其作用机制。目的:HUA是由嘌呤物质新陈代谢紊乱引起的代谢性疾病,尿酸是嘌呤物质代谢的终末产物,其合成增加或排出过少均可导致HUA的发生。本研究通过贴敷HUA模型大鼠双侧的肝俞穴和期门穴、脾俞穴和章门穴、肾俞穴和京门穴,即肝脾肾的俞募穴,观察贴敷肝脾肾的俞募穴对HUA模型大鼠SUA、ALT、AST、XO、ADA、GD、HGPRT活性水平变化及大鼠一般情况和肝组织形态结构的影响。评价贴敷肝脾肾之俞募穴干预HUA模型大鼠的效果,初步探讨贴敷肝脾肾之俞募穴治疗HUA可能的相关机制,为穴位贴敷治疗HUA提供一定的理论依据,同时也为穴位贴敷治疗HUA在选穴和配穴方面提供临床指导。方法:将32只清洁级雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、假穴位贴敷组、穴位贴敷组,每组8只。从实验开始,其他三组大鼠按10 ml/kg灌胃氧嗪酸钾2 g/(kg.d)构建HUA模型大鼠,空白组灌胃等体积生理盐水,每日1次,连续10 d。10 d后所有大鼠尾静脉取血,用全自动生化分析仪测定大鼠SUA水平,与空白组对比,其余三组大鼠SUA水平明显升高(P<0.01),说明HUA模型制备成功。贴敷治疗时,所有大鼠每天灌胃改为隔天灌胃1次。空白组正常喂养,不做任何处理。模型组正常喂养,只抓取适当按压。假穴位贴敷组和穴位贴敷组分别给予凡士林贴敷贴和穴位贴敷药贴贴敷大鼠双侧肝俞穴和期门穴、脾俞穴和章门穴、肾俞穴和京门穴,每次贴敷6h,每日1次,5次为1个疗程,每个疗程结束后休息1d,共干预3个疗程,18 d。贴敷治疗后取材,采用全自动生化分析仪测定大鼠血清中SUA、ALT和AST水平;酶比色法检测肝组织XO和ADA的活性;酶联免疫法(ELISA)检测肝组织GD和HGPRT含量。结果:(1)SUA水平:造模第10d时,与空白组相比,模型组、假穴位贴敷组、穴位贴敷组大鼠SUA水平明显升高(P<0.01)。贴敷治疗后,与空白组相比,模型组和假穴位贴敷组大鼠SUA水平升高(P<0.01或P<0.05);与模型组和假穴位贴敷组相比,穴位贴敷组大鼠SUA水平降低(P<0.01)。(2)血清ALT和AST水平:贴敷治疗后,与其他三组相比,穴位贴敷组大鼠血清ALT水平升高(P<0.01);ALT水平无明显变化(P>0.05)。(3)肝组织XO和ADA活性:贴敷治疗后,与空白组相比,模型组和假穴位贴敷组大鼠肝组织XO活性水平升高(P<0.05),ADA活性水平无明显变化(P>0.05);与模型组和假穴位贴敷组比,穴位贴敷组大鼠肝组织XO活性水平降低,而ADA活性水平升高(P<0.05或P<0.01)。(4)肝组织GD和HGPRT活性:贴敷治疗后,与空白组相比,模型组和假穴位贴敷组大鼠肝组织GD活性水平升高(P<0.01或P<0.05);HGPRT活性水平无明显变化(P>0.05);与模型组和假穴位贴敷组比,穴位贴敷组大鼠肝组织GD活性水平降低(P<0.01),HGPRT活性水平无明显变化(P>0.05)。(5)肝组织切片观察:贴敷治疗后,光镜下观察,4组大鼠肝细胞之间排列整齐,相互衔接,以中央静脉为轴心呈放射状排列,肝小叶结构清晰完整,肝细胞索排列规则,肝细胞结构及形态正常,4组大鼠肝组织均未见明显的病理改变。结论:(1)贴敷肝脾肾之俞募穴能够显著降低HUA模型大鼠SUA水平,并能够有效改善HUA大鼠饮食、排泄功能、精神状态、活动反应能力等一般情况,对HUA有较好的治疗作用。(2)贴敷肝脾肾之俞募穴具有显著的降尿酸作用,其机制可能与抑制肝组织XO和GD活性有关,减少了尿酸的生成,从而降低了 SUA水平。