【摘 要】
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根据国外已经发表的非洲菊gCHS1cDNA的序列,设计并合成了一对能够与特定载体末端互补的引物,两个物之间的跨幅为1376bp.从刚刚开放非洲菊的黄色花的花瓣中快速抽提总RNA,经过
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根据国外已经发表的非洲菊gCHS1cDNA的序列,设计并合成了一对能够与特定载体末端互补的引物,两个物之间的跨幅为1376bp.从刚刚开放非洲菊的黄色花的花瓣中快速抽提总RNA,经过反转录-聚合酶链拭反应(RT-PCR)扩增出CHScDNA的特异性片段.利用DNA重组技术,将RT-PCR产物经过BamHI/EcoRI双酶切,回收酶切片段,克隆到载体质粒pBSSK中,得到了3个转化子,分别命名为:FZJ-pBCHS1、2、3.通过PCR、酶切等初步鉴定之后,随机挑取一个转化子,对转化子外源性片段进行双向序列测定.结果表明,该实验已经成功地克隆了非洲菊花CHScDNA片段,该片段的全长1376bp,编码一条由398个氨基酸组成的多肽.将该片段的开放阅读框与已经发表非洲菊化的gCHS1的开放阅读框进行比较,仅有2个碱基不同,同源性高达99.8﹪.
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