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目的:探讨干扰TIGAR基因在体外增强肝癌细胞HepG2对表阿霉素化疗敏感性的机制。方法:噻唑蓝(MTT)检测表阿霉素(Epi)对HepG2细胞的增殖抑制和IC50;Western blot检测表阿霉素对HepG2细胞内相关蛋白表达的影响;化学合成双链TIGAR siRNA1/2,检测其干扰效率;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测干扰TIGAR基因联合表阿霉素诱导细胞凋亡率,Western blot检测细胞内自噬和凋亡相关蛋白水平;2’,7’-二氯二氢荧光素双醋酸盐(DCFH2-DA)探针标记流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)、广泛性Caspases抑制剂(Z-VAD-FMK)和3-甲基腺嘌呤(3-MA)三个工具药分别降低细胞内活性氧的水平、抑制Caspases激活和自噬激活,检测细胞凋亡率和相关蛋白水平。结果:MTT结果显示表阿霉素对HepG2细胞增殖具有明显抑制作用,细胞增殖抑制率随着时间延长和药物浓度的增加而升高,表阿霉素作用12小时,IC50为78.14±3.27μg/ml;Western blot检测显示不同药物浓度作用12小时和同一药物浓度(5μg/ml)作用不同时间,细胞内p53、PUMA、TIGAR表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的水平下调,Bcl-2表达无明显变化。TIGAR siRNA1/2干扰效率大于85%(*** p<0.001);流式细胞术结果显示,干扰TIGAR基因联合表阿霉素组细胞凋亡率明显高于对照组(*P<0.05),并且该组细胞内活性氧水平、Caspase-3激活水平和自噬水平均明显高于对照组(*P<0.05)。应用NADPH降低活性氧水平和Z-VAD-FMK抑制Caspase-3激活后,细胞凋亡率明显降低;应用3-MA抑制自噬后,细胞凋亡率明显升高。结论:干扰TIGAR基因能增强肝癌细胞HepG2对表阿霉素的化疗敏感性,其凋亡机制涉及细胞内氧化应激、Caspase-3介导细胞凋亡途径的激活和自噬激活途径三条信号通路。