MicroRNAs(miRNAs)是由大的发卡型前体经过Dicer等酶的加工形成的小的、内源性非编码RNA,其长度约22个碱基左右。miRNAs可以通过组装成为有活性的RNA诱导的沉默复合物(RISC)来抑制基因表达。大量研究表明,miRNAs在细胞分化、细胞凋亡、免疫应答等多种生物过程中起着重要作用。大量研究表明,miRNAs的异常表达跟癌症的发生和形成息息相关,可以作为生物标记物用于诊断和预知及作为新药的作用靶标用于疾病治疗。双链特异性核酸酶(duplex-specific nuclease,DSN)是一种来自勘察加半岛拟石蟹属螃蟹胰肝腺中的核酸酶。DSN酶具有独特的底物特异性,只降解双链DNA及DNA/RNA杂交链中的DNA链,不可水解单链DNA、单链RNA及双链RNA。此外,DSN酶在一定长度内可以区分单碱基差异,赋予了DSN酶更加独特的性质。因此,DSN酶作为工具酶在生物医药、生物科学应用及生物分析等领域具有重要的应用前景。利用DSN酶的独特性质,将其作为信号放大工具应用于miRNAs的特异性检测,可以克服许多由miRNAs自身特点带来的检测弊端,包括家族序列同源性高难以区分、长度短难以检测及表达水平低等问题。我们利用DSN核酸酶的特性,结合纳米金消光系数大以及聚多巴胺纳米球(PDA)具有独特的吸附单链核酸及化学发光共振能量转移的特点,分别设计了纳米金聚集比色法及化学发光共振能量转移法用于miRNAs的特异性检测,操作简便,成本低廉,检测限可达pM级,并应用于细胞裂解液中miRNAs的分析检测。