论文部分内容阅读
为了探讨乳酸粪肠球菌作为反刍动物饲用微生物的可行性,以及评价含有乳酸粪肠球菌的复合益生菌制剂的有效性,本论文以锦江黄牛为研究对象,开展以下四方面研究:试验一:乳酸粪肠球菌对pH、胃液、肠液、胆盐耐受性研究试验分别采用不同pH值、牛瘤胃液、人工胃液、人工肠液及胆盐处理乳酸粪肠球菌,测定其不同时间的存活率,结果表明:(1)乳酸粪肠球菌对酸性耐受性较强,对碱性尤其是强碱(pH=10),耐受性较差;(2)0.2~0.4%浓度的胆盐处理乳酸粪肠球菌,对其存活率影响不大,但高浓度(0.5%)胆盐处理后,对其存活率影响较大。且随处理时间的延长,存活率下降明显;(3)乳酸粪肠球菌对天然牛瘤胃液耐受性比较强,处理3h,存活率仍有95%以上。而对人工胃液的耐受性较弱,经人工胃液处理3h后,存活率仅37.93%;(4)乳酸粪肠球菌对人工肠液的耐受性在2~4h内较强,存活率可达72.64%。而在4h以后,存活率明显下降。试验二:乳酸粪肠球菌对常见抗生素耐受性及其对常见肠道致病菌抑制作用研究采用琼脂稀释法测定乳酸粪肠球菌对常见抗生素耐受性,通过牛津杯扩散法研究其对常见肠道致病菌抑制作用。结果表明:乳酸粪肠球菌对阿散酸、杆菌肽锌、金霉素、喹乙醇、硫酸粘杆菌等5种药物有较强的耐受作用,对吉他霉素、盐霉素的耐性相对较差;对大肠杆菌K88有轻微的抑菌作用,对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌没有抑制作用。试验三:不同组成的乳酸粪肠球菌复合益生菌制剂对锦江黄牛瘤胃体外发酵的影响试验采用24h体外培养方法,设5个组,不添复合益生菌的基础日粮为对照组,4个试验组分别为在基础日粮中添加200mg/kg的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号复合益生菌。结果表明:(1)Ⅰ、Ⅱ、ⅡⅠ、Ⅳ复合益生菌和对照组的培养液pH值均在正常范围内;(2)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ复合益生菌的24h总产气量与对照组有显著的提高(P<0.05),以Ⅱ号复合益生菌的产气量最高为170.50ml;(3)Ⅰ、Ⅱ号复合益生菌微生物蛋白含量极显著高于其他组(P<0.01),其中Ⅱ号复合益生菌的微生物蛋白含量最高,达270.43mg/dl;(4)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ复合益生菌氨态氮浓度极显著低于对照组和第Ⅳ号复合益生菌(P<0.01);(5)Ⅱ、Ⅲ号复合益生菌干物质降解率极显著高于对照组(P<0.01);(6)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号复合益生菌丙酸和总VFA浓度极显著高于对照组(P<0.01),Ⅱ号丙酸浓度、总挥发性脂肪酸最高,乙酸/丙酸值极显著低于对照组(P<0.01)。试验四:不同水平乳酸粪肠球菌复合益生菌对锦江黄牛瘤胃体外发酵的影响采用24h体外批次培养方法,将不添加复合益生菌组为对照组,4个试验组分别在基础日粮中添加100、150、200、250mg/kgⅡ号复合益生菌,每组3个重复。结果表明:(1)添加Ⅱ号复合益生菌后,产气量有增加的趋势,pH值有降低的趋势,但差异不显著(P>0.05);(2)所有试验组氨态氮浓度极显著低于对照组(P<0.01),以150mg/kg组的氨态氮浓度最低,为20.92mg/dl;(3)200mg/kg组MCP浓度显著高于对照组(P<0.05),但与150mg/kg差异不显著(P>0.05);(4)200mg/kg组总VFA浓度极显著高于对照组、100mg/kg和250mg/kg(P<0.01)组,与150mg/kg组相比差异不显著(P>0.05);(5)对于乙酸/丙酸比而言,添加Ⅱ号复合益生菌有降低的趋势,其中200mg/kg菌组极显著低于对照组(P<0.01),显著低于100mg/kg、250mg/kg组(P<0.05),与150mg/kg相比差异不显著(P>0.05);(6)添加Ⅱ号复合益生菌各组干物质降解率均提高,其中150mg/kg菌组干物质降解率显著高于对照组(P<0.05);150mg/kg和200mg/kg组ADF降解率显著高于对照组(P<0.05)。结果提示:Ⅱ号复合益生菌可以促进VFA的产生和NH3-N利用,提高MCP产量,促进干物质和NDF的降解,有利于粗饲料利用。以150~200mg/kg为适宜添加量。综上所述:(1)乳酸粪肠球菌能耐受较低的pH,对胃液、肠液、胆盐耐受性较高,胃肠道中较稳定;(2)乳酸粪肠球菌对阿散酸、杆菌肽锌、金霉素、喹乙醇、硫酸粘杆菌等5种药物有较强的耐受作用;(3)添加复合益生菌能够稳定瘤胃内环境,促进VFA的产生和NH3-N利用,提高MCP产量,促进干物质和NDF的降解,进而改善瘤胃发酵功能,有利于粗饲料利用;(4)以Ⅱ号复合益生菌效果最佳,以150~200mg/kg为适宜添加量。