论文部分内容阅读
环磷酸腺苷(adenosine3’,5’-cyclic monophosphate, cAMP)作为“第二信使”参与调节细胞的多种功能,包括cAMP-依赖性的信号转导途径在心脏、肾脏等多种组织中参与调节钠泵活性。研究证实,洋地黄类物质之一的哇吧因(ouabain)或ouabain样强心苷可选择性地与钠泵结合并抑制其活性。在足够剂量的条件下,ouabain抑制钠泵介导的Na+转运,从而导致细胞内Na+的聚集。也有些研究报道,ouabain在大鼠视神经、狗的肾皮质、金鱼的肠粘膜、小鼠胰岛、鼠类上皮细胞和成纤维细胞株以及大鼠的脑和培养的肾集合管细胞等不同组织细胞中可增加cAMP的含量,并参与调节钠泵活性。然而,在心肌组织中ouabain对cAMP含量的研究甚少。在本室的前期工作中发现,ouabain通过抑制钠泵对家兔心房机械活动及其内分泌功能产生调节作用。因此,本研究假设ouabain对心房肌细胞的cAMP代谢可能产生调节作用,并影响钠泵活性。为了证实这一假设,利用家兔离体搏动的心房灌流模型,采用放射免疫、生理学及药理学等研究技术和“实施评价环核苷酸代谢”的实验方法,观察ouabain对家兔心房肌细胞cAMP含量的影响,并探讨其作用机制。本实验结果如下：1.处理Ouabain (3.0μmol/L)及其恢复期内,ouabain明显增加家兔心房的搏出量和搏动压(与对照循环比较,均P<0.001),同时增加cAMP的逸出量(与对照循环比较P<0.01)。Ouabain的这种效应大约持续70多分钟。2.在腺苷酸环化酶激活剂forskolinC0.1μmol/L)存在下,oubain进一步增加cAMP的含量(与对照循环比较P<0.001；与ouabain比较P<0.01)；而在磷酸二酯酶非选择性抑制剂IBMX(0.1μmol/L)存在下,ouabain的上述效应被消失(与IBMX比较P>0.05)。3.蛋白激酶非选择性阻断剂staurosporine (0.3μmol/L)未能改变处理ouabain时及其恢复期内心房搏出量和搏动压得到增加的效应(与对照循环比较,均P<0.001)。4.L-型Ca2+通道抑制剂nifedipine (1.0μmol/L)同样不能改变处理ouabain时及其恢复期内心房搏出量和搏动压得到增加的效应(与对照循环比较,均P<0.001)。同时处理staurosporine和nifedipine的结果类似于单独处理nifedipine时的效应。5. Na+/Ca2+-:交换体的抑制剂KB-R7943(1.0μmol/L)可明显阻断ouabain在恢复期内增强心房机械活动的效应(恢复期的搏出量与对照循环比较P>0.05)。本研究结果提示：1. Ouabain通过抑制PDE的途径明显增加家兔心房cAMP的含量；2. Ouabain通过抑制钠泵对心房发挥正性肌力作用。