论文部分内容阅读
吉富罗非鱼(Genetically Improved Farmed Tilapia, GIFT)是经遗传性状改良后的罗非鱼,是利用尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的亚洲品系与非洲品系选育而成的新品系,是世界鱼类研究中心与挪威等有关研究机构协作实施罗非鱼遗传改良计划取得的成果。该品种具有生长速度快、遗传性状稳定、出肉率高等优点,是中国一个新的重要养殖品种。低温是一种重要的应激因子,它可以引起乌颊鱼鱼体溶菌酶、补体活性等免疫相关指标的变化,遮目鱼鱼体血清总蛋白、葡萄糖、甘油三酯等血液生化指标的变化,鲤鱼谷丙转氨酶、大黄鱼谷草转氨酶等酶类以及皮质醇、儿荼酚胺等激素的变化。同时,低温胁迫还可以引起大西洋鲑体内热应激蛋白70(HSP70)含量的升高。有关急性冷应激并恢复对吉富罗非鱼血清生化、免疫指标、激素以及组织中应激蛋白HSP70的影响,还未见报道。鉴于此,本实验旨在研究急性低温胁迫及恢复对于吉富罗非鱼体生理机能的影响,为研究吉富罗非鱼冷应激作用机制提供一些理论基础。1急性低温胁迫对吉富罗非鱼血清生化、、免疫及激素水平的影响实验选取平均体重为177-179g的吉富罗非鱼作为实验对象,设定(25±1)℃对照组和低温(9±1)℃冷应激试验组,每组设定5个平行组,分别在冷应激后的Oh、2h、6h、12h随机采样,测定血清Glu、胆固醇、甘油三酯、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、补体3、补体4、溶菌酶、皮质醇、三碘甲腺原氨酸、甲状腺素水平。结果表明：与对照组相比,试验组Glu水平在冷应激后6h, Chol在应激后6h、12h,TG水平在冷应激后2h、6h, ALT水平在冷应激后2h、12h均有显著升高(P<0.05)；试验组AST、皮质醇、T3水平在冷应激持续2h、6h、12h时出现显著升高(P<0.05),C3、C4、LSZ水平在冷应激2h、6h、12h时均出现显著下降(P<0.05)。T4含量在应激后与对照组相比,无显著差异。可见,急性低温应激可以引起吉富罗非鱼体的生理机能的变化,导致其免疫力的下降。2急性低温胁迫后的恢复对于吉富罗非鱼血清生化、免疫、激素水平的影响实验选取规格基本一致的健康吉富罗非鱼150尾。实验分为(25±1)℃对照组、低温(9±1)℃冷应激试验组以及(25+1)℃恢复组。待冷应激2h后,一部分留作采样,其余实验鱼转入(25±1)℃水中进行热恢复,分别在恢复期的6h、24h采样。实验结果表明：与对照组相比,试验组Chol、TG水平在冷应激2h时有显著升高(P<0.05)。ALT水平在冷应激2h时出现显著升高(P<0.05),经6h恢复仍显著高于对照组水平。AST水平在冷应激及恢复期内均出现显著升高(P<0.05)。C3、C4、LSZ水平在冷应激后均出现显著下降(P<0.05),其中,C3经过24h恢复仍出现显著下降(P<0.05),而LSZ经过24h恢复已与对照组无显著性差异。皮质醇在冷应激后及恢复期均出现显著升高(P<0.05),T3在冷应激后出现显著升高(P<0.05),但经过6h恢复已无显著差异,T4在应激及恢复期内均无显著性差异。3不同急性低温胁迫时间及恢复对吉富罗非鱼不同组织HSP70基因表达的影响实验设定(25±1)℃对照组、低温(9±1)℃冷应激试验组以及(25±1)℃恢复组,对照组与试验组鱼体初始温度均控制为(25±1)℃,待冷应激2h后,一部分留作采样,其余实验鱼转入(25±1)。C水中进行热恢复,并在热恢复6h、24h时采样。实验结果表明：与对照组相比,试验组肝脏HSP70mRNA表达水平在冷应激12h及恢复期内均出现显著升高(P<0.05)；在脾脏中,其则在冷应激6h、12h及6h恢复后时出现显著升高(P<0.05)；肾脏中HSP70mRNA的表达水平在经过冷应激6h、12h及24h恢复后出现显著升高(P<0.05)；在心脏中其于冷应激12h后出现显著升高(P<0.05),在热恢复期内无显著差异。可见,低温对吉富罗非鱼体的正常生理机能造成了一定的影响,包括免疫机能等,与此同时,也引起了体内各组织中HSP70mRNA表达水平的升高；在热恢复期内,部分指标已得到了恢复,而组织中的HSP70mRNA此时出现进一步的升高,这也许可以间接表明HSP70对于低温应激后的恢复起到了一定的作用。