用NMR方法选择性检测蛋白质的支链NH2信号

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本文发展了一个选择性检测蛋白质的支链NH2信号的脉冲实验,并用该实验获得了蛋白质PDZ7的支链NH2信号的识别。此外,在本论文中对新的NMR实验方法、以及NMR在蛋白质结构测定中的应用做了较为全面的论述。具体的内容如下: 1.论文的第一章对蛋白质结构测定中的基本NMR原理、新的NMR实验方法做了较详细的论述,尤其是在同位素标记技术、提高NMR灵敏度、三共振实验等方面做了较为详细的探讨。 2.论文的第二章对NMR在蛋白质结构测定中的蛋白质样品制备、NMR实验、蛋白质的NMR谱的分析归属、蛋白质结构计算等做了论述。 3.在论文的第三章中,对梯度灵敏度增强HSQC实验进行了改进。在其t1演化期加入一段延时t(t=1/2JNH),在该段延时中,标量耦合(JNH)的进动使得NH信号变得不可观测,而NH2信号被保留。并用这一改进的HSQC实验选择性检测PDZ7的支链NH2信号,测定了PDZ7的5对支链NH2信号。此外,用三共振实验方法完成了蛋白质PDZ7的主链的顺序认证。
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