恶性肿瘤普遍存在,恶性肿瘤细胞增殖活跃、代谢旺盛,与正常细胞能量代谢不同。肿瘤细胞自身可通过糖酵解和氧化磷酸化（OXPHOS）转换适应代谢环境的改变。在正常细胞中,丙酮酸通过线粒体氧化磷酸化被氧化为CO2,在无氧条件下生成乳酸;在肿瘤细胞中,丙酮酸在有氧条件下代谢产生大量乳酸、消耗大量葡萄糖。肿瘤细胞中的这一现象被称为“Warburg”效应,是肿瘤标志性特征之一。SIX1（Sine oculis homeobox 1）是同源盒基因家族中的成员,与胚胎细胞发育、器官分化有关,促进前体细胞增殖和生存。SIX1作为癌基因,可调节细胞周期进程,常高表达于恶性肿瘤中,可促进肿瘤细胞增殖、存活、迁移和侵袭。但SIX1蛋白的翻译后修饰是否调控糖酵解和肿瘤生长还不清楚。我们实验室报道了SIX1是肿瘤糖酵解的一个重要转录因子,它通过调控糖酵解促进肿瘤生长。我们通过磷酸酯酶处理肿瘤细胞裂解物后,Western blot结果表明SIX1存在磷酸化修饰,NANOLC-MS/MS质谱筛选到SIX1磷酸化位点为S230。免疫共沉淀表明,它与蛋白激酶ERK2（Extracellular signal-regulated kinase 2）存在相互作用,且ERK2能使SIX1 Ser230位点发生磷酸化。荧光素酶报告基因活性分析、染色质免疫沉淀（Ch IP）和Western blot实验表明,SIX1通过结合在糖酵解基因GLUT1、PGK1、PKM2的启动子上,促进这些基因的转录和表达,但SIX1（S230A）突变体或SIX1（S230E）突变体均不能结合到这些糖酵解基因启动子上,也不能促进它们的转录和表达。糖酵解功能实验表明,野生型SIX1调控肿瘤细胞的葡萄糖摄取、丙酮酸生成、乳酸水平和ATP产生,但SIX1（S230A）突变体或SIX1（S230E）突变体丧失这些功能。CCK8实验、划痕实验、Transwell实验表明,野生型SIX1在体外促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,在荷瘤裸鼠体内促进肿瘤细胞的生长,并促进糖酵解基因GLUT1、PGK1、PKM2的表达;但SIX1（S230A）突变体或SIX1（S230E）突变体均不能促进糖酵解功能及体内外肿瘤细胞生长。免疫组织化学实验表明,磷酸化（p SIX1）在肿瘤患者组织中的表达水平高于正常组织。综上所述,SIX1蛋白质的磷酸化修饰在调控SIX1的糖酵解功能和肿瘤生长中至关重要,为靶向糖代谢治疗肿瘤提供了新的候选靶标。