原子力显微镜对八种溶液及经溶液处理后人红细胞形态结构的观察

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目的 寻找AFM观察人体红细胞样本的最佳溶液,观察红细胞的表面细微结构,探测AFM下溶液渗透压对红细胞形态的影响。 材料与方法 利用AFM对实验室常见的8种溶液进行观察,这8种溶液包括1%甲醛溶液、PBS缓冲液(ph=7.2)、枸橼酸盐缓冲液(ph=6.0)、生理盐水、(?)%葡萄糖溶液、TAE溶液、1640培基、5%EDTA-K2溶液,8种溶液做成(?)个可进行扫描的样本,采用Contact模式,对每个样本扫描10个区域,(?)描范围为50μm,扫描速率为1Hz。 利用AFM(?)察经上述8种溶液处理过的人红细胞,采用Tapping模式,每种样本(?)描5个区域;每个区域扫描范围为30μm~0.5μm,扫描顺序依次为(?)μm、一个红细胞、红细胞膜表面周边和中央分别扫描1μm及0.5μ(?)大小的区域(0.5μm区域是在1μm区域内的进一步放大);扫描速(?)为0.5Hz~1.5Hz。 利用AFM(?)察经0.6%Nacl溶液和1.5%Nacl溶液处理过的红细胞,采用Tapping(?),每种样本扫描5个区域;每个区域扫描范围为30μm~0.5μm,(?)描顺序依次为30μm、一个红细胞、红细胞膜表面周边和中央分别扫(?)1μm及0.5μm大小的区域(0.5μm区域是在1μm区域内的进一步(?)大);扫描速率为0.5Hz~1.5Hz。 结果 1%甲醛溶液、枸橼酸盐缓冲液、5%葡萄糖溶液、TAE溶液、5%EDTA-K2溶液含有不规则形颗粒,颗粒数量不多;PBS缓冲液含4种形状的颗粒,颗粒数量多;生理盐水含4种形状的颗粒,颗粒数量多;1640培基含雪花状颗粒,颗粒数量多。 8种溶液对红细胞处理后,从样本的背景颗粒、红细胞的大小形态、红细胞膜表面的微细结构来考虑,1%甲醛全血样本、枸橼酸盐全血样本、5%葡萄糖全血样本、TAE全血样本背景颗粒少,红细胞大小形态正常,膜表面细微结构清晰、呈孔洞和条形隆起状。 与5%葡萄糖这种等渗溶液处理过的全血样本相比,0.6%Nacl溶液处理过的红细胞膨胀,直径增大,细微结构中孔洞呈裂隙状,条形隆起原子力显微镜对八种溶液及经溶液处理后人红细胞形态结构的观察增粗;1.5%Nacl溶液处理过的红细胞皱缩,直径变小,细微结构中孔洞呈裂隙状,条形隆起变窄。结论1%甲醛溶液,构椽酸盐缓冲液,5%葡萄糖溶液和TAE溶液可继续应用于原子力显微镜红细胞的观察研究。红细胞膜表面细微结构呈孔洞状、条形隆起状。0.6%Nacl溶液和1 .5%Nacl溶液处理过的红细胞由于渗透压改变,红细胞大小形态和膜表面微细结构发生相应的改变。
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