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治疗性克隆为我们展示了未来疾病治疗的美好前景，但是很多因素限制了其实践应用的可能性。例如核移植的效率还很低、大量人类卵母细胞的缺乏以及胚胎干细胞的定向分化效率还相对较低。本文分离培养了成人骨髓间充质干细胞，在对其生物学特性研究的基础上，以这种多能成体干细胞为供体，构建了人一兔重构胚胎，以期提高囊胚发育率。获得特定类型的细胞是治疗性克隆临床应用的前提，本文通过培养体系的诱导，使小鼠胚胎干细胞分化为胰岛细胞，并试图提高分化效率。
1.成人骨髓间充质干细胞生物学特性研究用Percoll(1.073g/ml)液对成人抗凝骨髓进行密度梯度离心，分离获得MSCs并在含10﹪胎牛血清的L-DMEM中培养。原代细胞经细胞化学染色，呈PAS强阳性、ALP阳性率约5﹪、SBB阴性。流式细胞仪分析表明，处于G0/G1期、G2/M期和S期的细胞比例分别为88.26﹪、0.96﹪和10.87﹪。利用MTT法测定原代成人骨髓MSCs的生长曲线，表明原代骨髓MSCs接种后3d进入快速生长期，细胞生长状态良好。应用流式细胞仪检测细胞表面5种表面标记分子，测定结果表明，所获得的MSCs呈CD34阴性、CD45阴性、CD29阳性、CD44阳性、HLA-DR阴性，表型均一。
2.以成人骨髓间充质干细胞为供体构建人-兔重构胚胎将生长到汇合期的成人骨髓充质干细胞消化成单个细胞，移入去核的兔MII期卵母细胞的卵周隙，3次直流电(2.4kv/cm，20μs，间隔1s)脉冲刺激融合并同时活化重构胚胎。重构胚胎在含10﹪胎牛血清的M199培养液中，38℃、5﹪CO2条件下培养。成人骨髓间充质干细胞可以在兔卵母细胞中重编程，约5.9﹪的重构胚胎发育到囊胚期。
3.定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛细胞的研究将ES-D3小鼠胚胎干细胞悬浮培养7d形成拟胚体，然后进行贴壁培养，加入分化培养液1诱导6d，然后用分化培养液2诱导6d，最后用含不同浓度的亚硒酸钠的培养基诱导20d。对诱导后获得的胰岛素产生细胞团(IPCC)细胞进行双硫腙(DTZ)染色。体视学分析显示，当亚硒酸钠浓度为270μmol/L时，DTZ阳性率为57.8﹪，上升至最高点。ELISA法检测胰岛素分泌释放试验结果显示，270μmol/L亚硒酸钠诱导的细胞释放的胰岛素最多，为0.63ng/IPCC。