【摘 要】
:
目的:先前实验证明骨关节炎患者的软骨细胞中mi R-145水平的显著下调,探究mi R-145是否调控lncRNA参与软骨细胞凋亡影响骨关节炎发生发展,本课题首次对高表达mi R-145的人软骨细胞的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)进行了高通量测序,通过生物信息学分析筛选出与高表达mi R-145后相关的lncRNA,从而进一步验证和探讨mi R-145调控相
论文部分内容阅读
目的:先前实验证明骨关节炎患者的软骨细胞中mi R-145水平的显著下调,探究mi R-145是否调控lncRNA参与软骨细胞凋亡影响骨关节炎发生发展,本课题首次对高表达mi R-145的人软骨细胞的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)进行了高通量测序,通过生物信息学分析筛选出与高表达mi R-145后相关的lncRNA,从而进一步验证和探讨mi R-145调控相关lncRNA抑制骨关节炎软骨细胞凋亡的潜在功能。方法:选取生长状态良好的人软骨肉瘤SW1353细胞系,进行软骨细胞传代培养,通过转染腺病毒载体过表达软骨细胞mi R-145基因。将干预条件不同的软骨细胞分为两组:空载腺病毒组(Ad-NC组)和mi R-145过表达组(Ad-Lv145组),通过第二代高通量测序技术分析Ad-Lv145与Ad-NC两组样本,筛选差异表达的lncRNA,采用基因本体论(Gene Ontology,GO)研究差异表达的lncRNA功能,最后通过实时定量荧光PCR(q RT-PCR)对lncRNA和凋亡信号关键因子进行验证。结果:1.高通量测序结果显示,Ad-Lv145组和Ad-NC组中测得5439个lncRNA。与对照组相比,Ad-Lv145组中鉴定出70个上调的和61个下调的lncRNA(P<0.05)。高通量测序m RNA谱显示,Ad-Lv145和对照组中检测出30874个基因,其中与Ad-NC组相比,分别有34个显著上调和35个下调的基因(P<0.05)。2.GO富集分析出p53介导的细胞信号转导,蛋白激酶负调控信号传导和细胞皮层。与对照组相比,实验组中的上述结果显著富集并有意义。3.GO富集分析筛选出p53介导的细胞信号转导及差异最显著的lncRNA(AL627171)。4.对lncRNA AL627171、p53 m RNA和Bax进行q RT-PCR验证,结果证实mi R-145过表达可以上调lncRNA(AL627171)抑制p53基因的表达进而抑制Bax的表达。结论:研究发现,lncRNA在软骨发育及OA病理进程中起到重要的调控作用,本实验通过对人软骨肉瘤细胞SW1353中过表达mi R-145,高通量测序分析发现共有个70上调和61个下调的lncRNA(P<0.05)。与对照组相比,在Ad-Lv145组中发现34个上调和35个下调的基因(P<0.05),GO富集分析筛选出p53介导的细胞信号转导和显著差异的lncRNA AL627171。进一步采用q RT-PCR证明mi R-145过表达可以上调lncRNA AL627171从而下调p53基因表达,进而抑制骨关节炎软骨细胞的凋亡,为以后研究lncRNA在OA发生发展中的分子机制提供理论依据。
其他文献
目的:近几十年来,我国糖尿病患病率逐年攀升,糖尿病病人的生存时间逐年延长,多年的糖尿病病史容易累及心、脑、肾等各重要脏器。由于糖尿病肾病的隐匿性,许多糖尿病肾病的病人发病时已经进入糖尿病肾病的晚期到糖尿病肾病尿毒症期。糖尿病肾病尿毒症期多数需要长期血液透析维持性治疗。为了进一步延长糖尿病肾病尿毒症期患者长期生存率,控制稳定的血糖浓度,是我们临床医生的主要责任。除了管理好病人进行药物控制好血糖浓度,
抗苗勒氏激素(anti-Müllerianhormone,AMH)是TGF-β家族的一种二聚糖蛋白成员。在女性中,AMH主要来源于窦前和早期窦前卵泡,近年来发现可以提示卵泡池的大小。虽然AMH水平在许多情况下被用来评估卵巢储备,但它最常用的作用是评估在辅助生殖中卵巢刺激的反应性。AMH在生殖期由卵巢颗粒细胞表达,并通过抑制FSH过度的卵泡募集来限制初级卵泡的形成。在这种情况下,AMH可以预测回收的
目的:对比超声评估方法与膝骨关节炎常用的临床评估(VAS评分、WOMAC评分)、影像学评估(DR、MRI)之间的相关性,探讨超声检查在膝骨关节炎病人评估中的价值及无创检查对临床的帮助。方法:选取2019年11月~2020年12月于山东省济宁市济宁医学院附属医院骨关节科门诊出现膝关节疼痛、肿胀、活动受限等症状,且排除关节外伤、手术史的膝骨关节炎患者作为本研究中的对象[n=120例,女67例,男53例
目的:探讨尺骨斜形截骨治疗尺骨撞击综合征的早期疗效,同时分析尺骨撞击综合征患者可能引起腕骨发生囊性变的原因及尺骨斜形截骨术后腕骨囊性变的变化结局。方法:回顾性分析2018年7月至2019年12月济宁市第一人民医院手足外科总院病区及东院病区的22例尺骨撞击综合征,随访12个月以上,通过比较其术前和末次随访时尺骨变异情况、目测类比评分以及改良的Mayo腕关节评分,对该术式的早期临床效果进行评价。从性别
目的:肉芽肿性乳腺炎(granulomatous mastitis,GM)是一种相对少见的乳腺良性慢性炎症性疾病,目前GM的病因及发病机制尚不明确,治疗方案也多种多样,若治疗不当则病情迁延不愈,甚至有患者因此切除了整个乳房,给患者带来经济负担的同时也严重影响着患者的身心健康。因此,本研究的目的是比较分析糖皮质激素联合手术治疗肉芽肿性乳腺炎的临床疗效及治疗后乳房外观的情况,希望对治疗GM提供指导。方
目的:通过建立大鼠脊髓损伤模型,研究骨化三醇在脊髓损伤中的潜在神经保护作用,并确定其对于Nrf2核转位及氧化应激相关因子NOX2的调控作用,分析以上指标是否参与了大鼠脊髓损伤后的运动功能恢复。方法:使用96只SPF级成年雄性SD大鼠随机分成四组(每组24只):假手术组、脊髓损伤组(模型组)、2ug/kg骨化三醇治疗组(治疗组)、30mg/kg自噬抑制剂(3-MA)干预组(自噬抑制组)。使用电动脊髓
目的:确定髋臼前后柱间四边体周围的安全螺钉通道,测量安全螺钉通道的进钉点、出钉点的位置,分析各点的解剖学参数、各点之间的关系及螺钉的长度及方向,为临床操作提供数据支持。方法:选取济宁医学院附属医院正常成年人的完整骨盆CT断层扫描数据,导入3D图像生成及编辑处理软件Mimics Medical 20.0软件中,建立骨盆三维数字模型,以弓状线与耳状面前缘交点与髂前下棘的连线中点分别于冠状面、横断面做垂
目的:对比分析经右侧胸部第三肋间小切口与胸骨正中切口行单纯主动脉瓣置换术,进一步证明经右侧胸部第三肋间小切口行主动脉瓣置换术的安全性及有效性,为临床应用提供参考依据。方法:收集资料:回顾性分析济宁医学院附属医院心脏外科2013年6月至2020年5月,因主动脉瓣病变行首次单纯主动脉瓣置换的123例患者,其中,微创组(经右侧胸部第三肋间小切口行主动脉瓣置换)40例,常规组(经胸骨正中切口行主动脉瓣置换
目的:骨质疏松症(Osteoporosis,OP)是一种以骨量的减少以及骨组织的微结构破坏,可导致骨脆性增加及易于骨折的代谢性骨病。其主要原因是过量的骨吸收超过成骨细胞的骨形成从而导致骨质疏松。既往研究表明lnc RNA与破骨细胞形成密切相关,本研究主要探索Lnc RNA-ANCR在破骨细胞分化过程中的作用及其可能的机制,为研究破骨细胞的形成以及分化机制提供可能的理论依据,为治疗骨质疏松症提供新的
背景:烟雾病是一种罕见的脑血管疾病,其特征是颈内动脉及其分支动脉进行性狭窄或闭塞,并伴有基底动脉环烟雾状血管形成。各种外科颅内外搭桥技术已经在成人患者中广泛应用,以改善脑灌注,防止出血或缺血性卒中发作。然而,成人烟雾病患者血流动力学不稳定,术后可逆性神经功能缺损(RND)发生率较高,相关危险因素仍不确切。目的:本研究旨在了解成人烟雾病患者发病的临床特点,探讨烟雾病患者术后发生RND的高危危险因素,