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高温导致的热应激会给养殖场的畜禽生产带来严重危害,它能显著影响断奶仔猪胃肠道微生态平衡、降低免疫力并破坏机体的抗氧化防御系统。热应激引起的不利影响,如食欲降低、体重减轻、饲料利用率下降、过高的发病率和死亡率等,给养殖业造成巨大的经济损失。硒是动物机体必需的一种微量营养元素,通过在动物机体内转化为硒蛋白(如谷胱甘肽过氧化物酶,碘化酪氨酸脱碘酶等)的形式在动物健康和疾病过程中发挥着重要作用,如提高机体免疫力、抗氧化能力、抗肿瘤和调节机体代谢等。益生菌有保持胃肠道微生物菌群的平衡,防止病原微生物在肠道内增殖,减缓肠道炎症感染,改善消化系统能力和刺激宿主免疫系统的作用。研究表明,硒或益生菌等可作为抗热应激添加剂添加到仔猪日粮中以减轻热应激对仔猪健康和生产性能的不利影响。本实验室通过生物转化的方法,利用益生菌将无机硒转化为有机硒的富硒益生菌制剂,它是一种富含有机硒和高活性益生菌的饲料添加剂,可发挥有机硒和益生菌的双重作用。本实验室先前的研究表明,在不同动物的日粮中添加富硒益生菌(包括乳酸杆菌和酵母菌)具有提高生产性能,增强抗氧化能力,调节肠道菌群的作用,但尚未进行有关富硒益生菌抗热应激效果的研究。本研究试图通过在日粮中添加富硒益生菌,探索其对高温条件下仔猪的生产性能、抗氧化能力、血硒含量、甲状腺激素含量和粪便中菌群多样性的影响,评价其作为抗热应激添加剂的应用效果,为其在畜牧生产上的广泛应用提供理论基础。试验1富硒益生菌对高温条件下仔猪生产性能的影响某猪场三元杂交(杜×长×大)28日龄断奶仔猪48头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复4头猪,所有猪只均在同一栋猪舍内饲养。整个试验期为42天。试验期间,前33天的平均温度为38℃,后9天的平均温度为42℃。试验分组情况:第一组为空白对照组,饲喂基础日粮;第二组为益生菌组,饲喂基础日粮加益生菌,其中活菌数与富硒益生菌组的相同;第三组为亚硒酸钠组,饲喂基础日粮加0.3mg/kg硒的亚硒酸钠;第四组为富硒益生菌组,饲喂基础日粮加0.3mg/kg的富硒益生菌(富硒益生菌和益生菌中活菌数量相等)。各试验组中基础日粮硒含量为0.16ng/kg,力口硒后日粮的总硒含量为0.46mg/kg。在试验结束后,测定仔猪的平均日增重、平均日采食量、料肉比和腹泻率。结果:与对照组相比,富硒益生菌组、亚硒酸钠组和益生菌的末重分别增加了15.35%(P<0.05)、6.63%(P>0.05)和6.85%(P>0.05);与对照组相比,富硒益生菌组、亚硒酸钠组和益生菌的平均日增重分别增加了22.58%(P<0.05)、9.87%(P<0.05)和10.32%(P<0.05),且富硒益生菌组与亚硒酸钠组和益生菌组之间有显著差异;富硒益生菌组的料肉比显著低于亚硒酸钠组、益生菌组和对照组(P<0.05),亚硒酸钠组和益生菌组的料肉比显著低于对照组(P<0.05);富硒益生菌组和益生菌组仔猪的腹泻率显著低于亚硒酸钠组和对照组(P<0.05),富硒益生菌组和益生菌组之间无显著差异(P>0.05)。结论:日粮中添加富硒益生菌可以提高高温条件下仔猪的生产性能,降低仔猪腹泻率。试验2富硒益生菌对高温条件下仔猪血硒含量和GPx活性及甲状腺激素(T3和T4)的影响试验分组和动物饲养同试验1。于试验的第0、14、28和42天,每组随机选择3头猪,采集血液样品,用于分析血硒含量、全血GPx活性和血清甲状腺激素(T3和R4)含量。结果:在试验的第14、28和42天,富硒益生菌组和亚硒酸钠组血液中GPx活性和血硒含量与对照组相比均显著升高(P<0.05),富硒益生菌组均高于亚硒酸钠组;在试验的第28天和42天,与对照组和益生菌组仔猪相比,富硒益生菌组和亚硒酸钠组仔猪血清中T3含量显著升高(P<0.05)而T4含量显著降低(P<0.05),同时,富硒益生菌组和亚硒酸钠组差异不显著。结论:日粮中添加富硒益生菌和亚硒酸钠均能提高高温条件下仔猪全血中GPx活性和血硒含量,提高血液中T3含量并降低T4含量。试验3富硒益生菌对高温条件下仔猪肠道菌群区系的影响试验分组和动物饲养同试验1。于试验的第0、14、28和42天,每组随机选择3头猪,采集新鲜粪便样品,用于选择性分离培养仔猪粪便中肠杆菌、乳杆菌、葡萄球菌、肠球菌和双歧杆菌并计数。结果:在试验的第28天和42天,与对照组和亚硒酸钠组仔猪相比,富硒益生菌组和益生菌组仔猪粪便中乳杆菌数量极显著提高(P<0.01)且肠杆菌数量极显著降低(P<0.01),富硒益生菌组和益生菌组相比无显著差异(P>0.05),对照组和亚硒酸钠组相比也无显著差异(P>0.05),同时,整个试验期间,各组仔猪粪便中肠球菌、葡萄球菌和双歧杆菌数量均无显著差异(P>0.05)。结论:日粮中添加富硒益生菌和益生菌能调节高温条件下仔猪肠道中有益菌和有害菌的比例,有利于仔猪肠道环境的稳定。试验4富硒益生菌对高温条件下仔猪肠道菌群多样性的影响试验分组和动物饲养同试验1。于试验的第42d,每组随机选择4头仔猪,采集新鲜粪便样品,用PCR-RFLP方法分析日粮中添加富硒益生菌后高温条件下仔猪肠道菌群多样性变化。用合适的引物对粪便中提取的总细菌16SrDNA的V3、V4和V5区进行扩增,分别用限制性内切酶Hha Ⅰ, Afa Ⅰ, Alu Ⅰ和Msp Ⅰ对PCR扩增产物进行酶切,酶切的总条带数作为肠道菌群多样性的量度。结果:富硒益生菌组和益生菌组与亚硒酸钠组、对照组之间的酶切总条带数均差异显著(P<0.05),亚硒酸钠组和对照组之间无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,富硒益生菌组、亚硒酸钠组、益生菌组的相似性系数分别为65.0%、74.6%和68.1%。结论:日粮中添加富硒益生菌能够增加高温条件下仔猪肠道微生物菌群的多样性,富硒益生菌能明显改善肠道微生物组成。