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目的:研究乌司他丁对内毒素(LPS)诱导下的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的影响,探讨其治疗ARDS的可能作用机制,为乌司他丁的临床应用提供进一步理论基础与实验依据。方法:选用健康、雄性SD大鼠40只,随机分成5组:正常对照组:在SD大鼠尾静脉注射1ml生理盐水;LPS组:在SD大鼠尾静脉注射大肠杆菌内毒素(LPS)5mg/Kg(使用前生理盐水稀释至1ml),复制ARDS模型;LPS+UTI组:造模方法同前,复制ARDS模型后立刻于腹腔左侧注射乌司他丁10万U/Kg(使用前生理盐水稀释至1ml);LPS+SB203580组:造模方法同前,复制ARDS模型后立刻于腹腔右侧注射p38 MAPK阻断剂SB203580(5mg/Kg)(溶于0.1ml,10%二甲基亚砜DMSO,使用前用生理盐水稀释至1ml);LPS+UTI+SB203580联合组:造模方法同前,复制ARDS模型后立刻于腹腔左右侧分别注射乌司他丁和SB203580(剂量计算方法同前)。观察8h后,10%水合氯醛腹腔麻醉下开腹分离腹主动脉,抽取腹主动脉血测Pa O2,酶联免疫吸附试验(ELISA)测肺组织细胞因子TNF-ɑ的含量,蛋白印迹法(Western Blot)测肺组织p38 MAPK磷酸化蛋白表达程度,并行肺组织病理切片、电镜片对照分析。结果:1.大鼠一般情况比较:正常对照组大鼠活动自如,抓取时迅速逃避,精神状态好,呼吸均匀;LPS组大鼠出现精神萎靡,呼吸急促,口唇发绀,鼠毛散乱,行走不稳,并可听到部分大鼠哮鸣音;LPS+UTI组、LPS+SB203580组及二者联合组情况较LPS组好转。2.血气分析结果比较:LPS组Pa O2明显低于正常对照组(P<0.01),LPS+UTI组、LPS+SB203580组、LPS+UTI+SB203580联合组Pa O2均高于LPS组(P<0.01),以二者联合组升高最为显著,LPS+UTI组Pa O2高于LPS+SB203580组(P<0.05)。3.各组肺组织TNF-ɑ含量的比较:LPS组与正常对照组相比肺组织TNF-ɑ含量明显升高(P<0.01),LPS+UTI组、LPS+SB203580组、LPS+UTI+SB203580联合组肺组织TNF-ɑ含量均明显低于LPS组(P<0.01),以二者联合组最为显著,LPS+UTI组肺组织TNF-ɑ含量低于LPS+SB203580组(P<0.01)。4.各组肺组织p38 MAPK磷酸化蛋白表达程度比较:LPS组与正常对照组相比肺组织p-p38 MAPK的表达明显升高(P<0.01),LPS+UTI组、LPS+SB203580组、LPS+UTI+SB203580联合组肺组织p-p38 MAPK的水平均低于LPS组(P<0.01),以二者联合组最为显著,LPS+UTI组肺组织p-p38 MAPK的水平低于LPS+SB203580组(P<0.05)。5.TNF-ɑ、p-p38 MAPK的相关性分析:p-p38 MAPK与TNF-ɑ之间存在显著正相关(r=0.971,P<0.01)。6.肺组织病理片比较:正常对照组:肺组织结构完整、清晰,肺泡间隔均匀一致,无增厚;LPS组肺组织结构破坏,肺泡狭窄、塌陷,肺泡间隔增厚,富含炎性细胞浸润,同时可见肺微血管充血;LPS+UTI组、LPS+SB203580组、LPS+UTI+SB203580联合组相比LPS组肺组织损伤有所减轻,炎性细胞在肺泡间隔浸润减少,肺泡间隔增厚有所减轻。7.肺泡Ⅱ型上皮细胞电镜片比较:正常对照组:肺泡Ⅱ型上皮细胞胞质内板层小体密度均匀,形态清晰完整;LPS组:肺泡Ⅱ型上皮细胞胞质内出现板层小体排空并且显著,可见空泡化;LPS+UTI组、LPS+SB203580组及二者联合组与LPS组相比肺泡Ⅱ型上皮细胞胞质内板层小体排空及空泡化减轻。结论:在本实验中,p-p38 MAPK的表达程度与TNF-ɑ含量成正相关,在ARDS模型中,TNF-ɑ含量和p-p38 MAPK的表达量明显升高,Pa O2明显降低,经乌司他丁、p38MAPK特异性阻断剂SB203580和两者联合治疗后TNF-ɑ含量和p-p38 MAPK的表达量降低,Pa O2上升,且两者联合治疗比其单一治疗效果更明显,乌司他丁的疗效优于SB203580,由此可推论,乌司他丁对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)具有肺保护作用,并且乌司他丁通过对p38 MAPK通路的抑制,减轻炎症反应来达到治疗ARDS的肺保护作用,另乌司他丁联合p38 MAPK特异性阻断剂SB203580对ARDS的肺组织可达到协同保护作用,乌司他丁对ARDS的抗炎作用还存在其他通路。