元胡止痛片治疗痛经的功效成分及组方原理初步研究

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痛经通常表现为腹部疼痛,是和月经直接相关的周期性疼痛。疼痛多出现于骨盆,下背及大腿。原发性痛经指不伴随器质性病变的痛性月经,通常始于初潮后六个月内,排卵周期建立后。原发性痛经发病率在青少年中比成年人群高。流行病学调查显示,原发性痛经是年轻女性最常见的妇科疾病之一,其患病率高达45%-95%。原发性痛经的发病机制未被清楚阐明。非甾体抗炎药是目前临床有效并能迅速治疗痛经的主要药物,但因其伴随对肝脏、肾脏及消化系统的副作用临床应用受到限制。元胡止痛片由二味中药即延胡索(Rhizoma Corydalis)和白芷(Radix Angelicadahuricae)组成。元胡止痛片系收录于2010年版《中国药典》(一部)的标准制剂。研究表明元胡止痛片含有多种成分。其中延胡索乙素,延胡索碱,欧前胡素等含量较高且在国家生物制品检定所可获得标准品。元胡止痛片具有理气、活血、止痛之效。其对胃痛、痛经、胁痛和偏头痛的疗效作用在临床上已经得到证实。但是其治疗痛经的功效成分和组方原理尚不清楚。本课题选取延胡索中的延胡索乙素和白芷中的欧前胡素,采用缩宫素复制大鼠痛经模型和离体子宫模型,试剂盒检测受试大鼠血清和子宫组织中SOD活性和MDA含量、子宫组织细胞中NO含量、核内NF-κB水平,Western blot测定子宫组织细胞中iNOS、COX-2和i-κB蛋白表达,HE染色评价大鼠子宫组织病理等指标;探讨元胡止痛片、延胡索乙素、欧前胡素和延胡索乙素+欧前胡素即―成分组方‖(按照元胡止痛片实际含延胡索乙素和欧前胡素比率组方)的镇痛作用及其可能机制,旨在阐明元胡止痛片治疗痛经的主要功效成分可能的组方原理。研究结果:1、延胡索乙素和欧前胡素能显著延长缩宫素所致痛经模型大鼠扭体潜伏期,减少扭体次数;且―成分组方‖效果优于单用。2、欧前胡素能显著降低血清及大鼠子宫组织中MDA和NO含量,显著提高SOD活性。3、延胡索乙素可以降低子宫组织中MDA含量,但对血清中MDA含量无显著影响。4、延胡索乙素和欧前胡素能显著抑制痛经大鼠子宫组织细胞核内NF-κB的活化,抑制iNOS和COX的蛋白表达,提高i-κB的蛋白表达。5、元胡止痛片及其主成分延胡索乙素和欧前胡素能明显减少痛经大鼠子宫组织炎性细胞浸润,缓解子宫组织水肿。6、欧前胡素对大鼠离体子宫收缩无显著作用,而延胡索乙素显著降低Ach和PGF2a所致大鼠离体子宫收缩的幅度和频率,显著降低Locke’s溶液中缩宫素所致离体子宫收缩的频率、而对无钙浴液中缩宫素所致大鼠离体子宫收缩无显著作用。结论:1、证实延胡索乙素和欧前胡素是元胡止痛片治疗痛经的主要功效成分,其成分组方的疗效高于单用。2、发现延胡索乙素通过抑制子宫收缩起直接镇痛作用,而欧前胡素通过抑制脂质过氧化,降低COX-2和iNOS的表达协同延胡索乙素治疗痛经。3、初步揭示元胡止痛片的组方原理。研究证实,分别源自延胡索中的延胡索乙素和白芷中的欧前胡素是元胡止痛片治疗痛经的二个主要有效成分,而且在治疗痛经的作用强度、分子靶点和通路及其机制存在明显差异,但其在―成分组方‖中延胡索乙素明显扮演直接镇痛的君药地位,而欧前胡素则发挥间接辅助镇痛的臣药作用。4、主要不足在于,由于元胡止痛片中已知的化学成分至少十余种,故不能排除更多―成分组方‖会有更好的功效,或还有更复杂的机制尚需进一步研究。
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