羊绒是山羊的内层毛被,是次级毛囊的产物,其纤维有轻柔、光滑、细软等特点,是高档的纺织原料。绒的优良品质与组成它的结构蛋白—角蛋白和角蛋白关联蛋白有着密切的关系,其中角蛋白(Keratin, IF)在不同种绒山羊毛囊中含量和结构比较稳定,而角蛋白关联蛋白(Keratin associated protein, KAP)的含量则变化较大。为了探讨高甘氨酸/酪氨酸KAP家族基因表达与绒山羊重要经济性状—绒细度的关系,本文采用改良后的机械分离法分离兴盛期毛囊,并首次利用实时荧光定量PCR检测了KAP7.1和KAP8.2基因在辽宁新品系绒山羊初、次级毛囊中的表达情况;采用半定量RT-PCR检验KAP7.1和KAP8.2基因在心、肝、脾、肺、肾脏组织中是否表达;利用原位杂交技术对KAP7.1和KAP8.2基因在初、次级毛囊中表达进行定位。(1)实时荧光定量PCR结果显示:KAP7.1和KAP8.2基因在次级毛囊中表达均高于在初级毛囊中的表达,相对定量分析得到,KAP7.1在次级毛囊中的表达量是初级毛囊的2.28倍,而KAP8.2在次级毛囊中的表达量更高是初级毛囊的2.71倍。这两个基因在初、次级毛囊中表达程度的明显不同说明KAP7.1和KAP8.2基因差异表达是绒毛品质不同的主要原因之一,而且这两个基因均高表达于次级毛囊,因此我们推测它们对绒细度有重要的调控作用。(2)半定量RT-PCR结果显示:在辽宁新品系绒山羊的心、肝、脾、肺、肾脏组织中均未检测到KAP mRNA,说明KAP7.1和KAP8.2基因在毛囊中特异表达,在绒毛形成过程中发挥着重要作用。(3)原位杂交分析发现:KAP7.1和KAP8.2基因在初、次级毛囊的皮质层、内根鞘都有表达,表明KAP7.1和KAP8.2是组成绒山羊毛囊皮质层和内根鞘的结构蛋白之一,参与绒、毛的形成,对绒毛的生长和理化性质有重要的影响。除此之外,我们还发现KAP7.1基因在次级毛囊的毛母质有微弱的表达信号,可见KAP7.1也是次级毛囊毛母质的组成成分,KAP7.1和KAP8.2基因在辽宁新品系绒山羊毛囊中表达位置的不同,可能是造成绒毛品质差异的一个原因。本研究选在毛囊兴盛期,这个时期,KAP基因表达最强,便于深入探讨KAP基因参与绒毛形成时的动态变化,为最终了解KAP基因是如何影响绒毛品质奠定基础。