苦瓜皂苷的提取、纯化工艺及活性的研究

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苦瓜(英文名:bitter gourd;拉丁名momordica charantia L)为葫芦科苦瓜属植物苦瓜的果实。又名凉瓜、锦荔枝、癞葡萄等。苦瓜中含有很多营养成分,苦瓜皂苷是苦瓜中的有效成分之一,国内外研究表明,苦瓜皂苷具有降血糖、抗肿瘤、提高免疫、抑菌、消炎等作用。本文以苦瓜粉为研究对象,对其提取、纯化工艺优化,并对苦瓜皂苷的抗氧化和降血糖活性做了探讨。在苦瓜皂苷的提取工艺方面,我们采用了两种方法进行研究;首先是超声波辅助提取方法,通过单因素试验确定五个因素的最佳条件,然后通过PB试验和正交试验进一步优化得到超声波辅助提取工艺的最佳条件是料液比为1:40,超声功率为360W,超声时间30min,超声温度80℃、乙醇浓度70%;其次是酶解提取方法,通过单因素试验确定六个因素的最佳条件,通过PB试验和CCD试验找出酶解最优提取条件是:酶用量0.604%、pH值5.54、酶解温度51.7℃、料液比1:21.55、乙醇浓度70%、酶解时间90min;通过对4种大孔吸附树脂的比较,筛选出能有效纯化苦瓜皂苷的树脂AB-8,并进一步研究了AB-8纯化苦瓜皂苷的工艺条件。首先通过静态实验,确定了上样浓度为5mg/mL,上样液pH=10的条件下树脂对苦瓜皂苷具有最佳吸附性,浓度为80%乙醇对苦瓜皂苷具有最佳洗脱效果。其次,通过动态试验对树脂柱的吸附、解析性能进行研究,确定了树脂柱的上样流速为2BV/h,洗脱柱体积为4.5BV。对苦瓜皂苷的抗氧化活性和降血糖活性进行了探讨。研究发现,苦瓜皂苷对羟基自由基、超氧阴离子自由基、2,2-二苯代苦味酰基自由基(DPPH)具有良好的清除作用;通过应用建立抗糖尿病中药提取库并筛选具有胰岛素受体激酶(IRTK)激动剂作用的活性部位,发现苦瓜皂苷提取物可能具有激活IRTK活性,为抗糖尿病新药设计先导化合物提供了基础。
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