自身免疫性胰腺炎(autoimmune pancreatitis,AIP)是一种由自身免疫介导的特殊类型的胰腺炎。AIP是少见病,且由于临床表现多样,诊断困难,常误诊为恶性肿瘤。有关AIP的流行病学资料、临床诊治、长期随访的大样本研究在中国相对较少。有关AIP的机制和生物标志物的探索也是应对临床难题的亟需。本研究旨在:1建立并总结单中心AIP临床资料数据库,从单中心数据尝试回答相应临床热点问题;2尝试探索AIP新的的生物学标志物及讨论部分相关机制。研究分为以下两部分:第1部分临床研究1.1 1型自身免疫性胰腺炎(AIP)的流行病学及临床特点目的总结自身免疫性胰腺炎的流行病特征、临床表现和诊断经验,提高诊治水平。方法回顾性分析了北京协和医院自1998年1月1日至2016年12月31日所有确诊为1型AIP的临床资料。结果1共纳入194例1型AIP。该病发病的男女比例为3.51/1,平均发病年龄为(57± 15)岁。2最常见的症状是黄疸和腹痛等。最常见的胰腺外受累疾病是硬化性胆管炎、涎腺炎和IgG4肾病等。3 36.68%AIP患者合并糖尿病。4 IgG4、ANA、ESR、C反应蛋白和CA199均有助于疾病诊断和病情判断。病理、PET-CT和激素治疗反应均有助于AIP的诊断和鉴别诊断。结论中国AIP的发病率在逐渐增加。作为一种系统性疾病的胰腺表现,1型AIP有特殊的临床特点和实验室检查特点。AIP的诊断可应用多种检测手段和方法。1.2 2型自身免疫性胰腺炎的临床特点和诊治经验目的自身免疫性胰腺炎(autoimmune pancreatitis,AIP)近年来逐渐为临床所关注,其中以1型为主,而2型AIP在欧美人群的发病数目相对高,而亚洲人群中较为罕见。本文对北京协和医院的2型AIP患者的临床特点及诊治经验进行了总结,并与1型AIP进行了总结。方法该中心所有2001年1月1日至2016年12月31日期间符合国际共识诊断标准的2型AIP住院患者被纳入研究。所有入选患者的临床数据、实验室结果和影像学特征均得到详细记录、核实、统计学计算和随诊。结果1共有6例2型AIP患者被纳入研究。男女比例为2/1,发病平均年龄为38.4岁。2 67.7%(4/6)的患者合并溃疡性结肠炎。33.3%(2/6)的患者是无症状查体发现。3例患者通过病理确诊。3 50%(3/6)患者影像学表现为胰腺弥漫增大,50%(3/6)患者表现为胰腺肿物。4将2型AIP与1型AIP比较,明确有统计学差异的是黄疸和合并炎性肠病的比例(P<0.01);而在年龄、男女比例、其他临床症状、合并症、辅助检查和病理特点上两者虽然存在差异,但因例数少,其差异的统计学意义尚不显著。结论作为AIP的少见类型,2型AIP有其独特的临床特点。中国的2型AIP以男性为多,平均发病年龄低于1型AIP,大部分合并炎性肠病。1.3 AIP激素治疗的复发率及复发相关危险因素目的AIP是一种免疫相关的胰腺炎性疾病,类固醇治疗是其一线治疗方案,短期疗效好。但是有关激素治疗AIP的长期疗效和预后的研究却很少。本研究旨在研究AIP激素治疗后的复发率及复发相关危险因素及类固醇相关副作用。方法选择1998年1月1日至2016年12月31日出院的AIP病例,筛选出其中随访时间大于1年并且资料完备的149患者进行回顾性研究。将复发组和复发组的临床数据加以统计学分析,包括独立样本T检验、卡方检验、logistics回归和生存表分析等。结果1 20.13%患者出现了至少1次复发。2复发组和未复发组在性别比例、发病年龄、病程、合并DM、出现静脉曲张、影像学表现、合并症包括胆管炎、肾病、颌下腺受累和泪腺受累、是否合并胰腺外脏器受累、IgG4水平、CA199水平和初始激素用量上面均无明显统计学差异。3初次激素治疗疗程在未复发组和未复发组分别是779.42±709.22和284.56±190.91,(P=0.003)。4 20%(6/30)复发的AIP患者发生了第二次复发。合并胆管炎、合并胰腺外脏器受累组是二次复发的高危因素。5在复发组内,使用免疫抑制剂组的二次复发率低于激素组,但差异的统计学意义并不显著(12.5%VS 33.3%,P=0.194)。6长期使用激素的患者的严重副作用包括:2例股骨头坏死,1例桡骨骨折,1例糖尿病酮症。免疫抑制剂组仅有1例一过性肝功能异常。结论AIP使用激素治疗有效,但复发率约20.13%,二次复发的风险为合并胆管炎和胰腺外脏器受累。联用免疫抑制剂治疗AIP激素治疗后复发患者可能降低再次复发率。1.4自身免疫性胰腺炎合并肿瘤风险的病例对照及队列研究目的研究AIP发生恶性肿瘤的风险。方法通过回顾性队列研究,纳入北京协和医院1998年1月1日至2016年12月31日期间所有AIP患者,同时将1985年1月1日至2010年12月31日入院的酒精性慢性胰腺炎(Alcoholic chronic pancreatitis,ACP)患者作为对照组。结果1本研究共纳入199例AIP患者,其中194例1型AIP,5例2型AIP。有175名规律随诊的AIP患者和127例ACP患者被纳入研究。2 12名患者被发现患有恶性肿瘤(6.85%),而127名的ACP患者中仅有2名(1.57%)患有恶性肿瘤。AIP组恶性肿瘤发生率显著高于ACP对照组(P =0.026)。3 AIP组合并的12个癌症中有6个(50%)是结直肠癌。同样,AIP患者结肠息肉的发生率为7.04%,显著高于ACP的0.79%(P=0.00)。4在AIP患者的结肠腺瘤或结直肠癌中,IgG4的免疫过氧化物酶染色显示了 IgG4阳性浆细胞的弥漫性和标记性浸润。结论AIP是各种肿瘤高危患者,尤其结肠直肠癌和结直肠息肉。临床医生需要考虑对AIP患者进行早期结肠镜检查。第2部分血浆外泌体及外周血单个核细胞中MicroRNA在AIP诊断与预后应用及相关可能机制的研究目的探索AIP的发病机制和生物标志物。寻找外泌体(EV)和外周血单个核细胞(PBMC)内能够成为AIP相关生物标志物的miRNA。方法1本研究通过临床筛查纳入AIP、慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)对照和健康对照共三组人群。AIP组予以标准方案激素治疗,治疗前后进行血清学及影像学对比,疗效确切者入选。2通过分组抽血留取AIP激素治疗前后及其他对照组外周血20ml,分离其中血浆EV及外周血单个核细胞,并对外泌体进行抽样鉴定。3分别提取血浆及EV中的miRNA,质检后进行第二代基因测序建库,寻找差异表达miRNA并经逻辑分析初步筛选目标miRNA。4对入选miRNA进行靶基因预测,并通过生物学数据库寻找相关作用通路和调控网络。结果1.AIP外周血中的EV存在有稳定可测得的miRNA。2.外周血里的EV和PBMC中的miRNA在AIP治疗前后、CP和健康对照之间均存在显著的差异表达。外泌体内的miRNA差异表达数目和表达量均高于PBMC。3.利用二代测序技术,初步筛选出包括hsa-miR-3656在内的47个差异表达miRNA,为进一步寻找AIP的生物标志物和揭示AIP的发病机制奠定了基础。4.利用miRNA靶基因的KEGG通路富集分析,MAPK信号通路可能参与了 AIP对激素的反应并占据重要地位。结论EV和PBMC中的miRNA在AIP治疗前后、CP和健康对照之间均存在显著的差异表达,其中外泌体内的miRNA差异表达数目和表达量均高于PBMC。其中hsa-miR-3656等目标miRNA中可能成为AIP的生物学标志物。