论文部分内容阅读
对于具有显著抗菌活性的药用植物博落回中的活性成分血根碱,其药理药效研究不断开展,但血根碱的药代动力学研究少见报道。为了进一步阐明其作为中兽药在动物体内药代动力学规律,为其在生物体内的有效性和安全性评价提供实验数据,给血根碱的临床合理应用提供依据,本文对血根碱开展以下几方面的药物代谢动力学探索研究：建立高效、快速、准确可靠的血根碱等生物碱在鸡体内的液质联用定量分析方法；测定血根碱在鸡血液中的药代动力学规律；并对其在鸡组织器官内的药物残留及代谢物二氢血根碱残留进行分析。1、对鸡肉组织进行提取,离心沉淀分离制备供试品溶液,采用高效液相色谱电喷雾离子源-三重四级杆串联质谱对供试品溶液进行含量测定。建立了可以同时测定血根碱、二氢血根碱、白屈菜红碱以及二氢白屈菜红碱的方法,优化鸡肉组织中血根碱、二氢血根碱、白屈菜红碱、以及二氢白屈菜红碱的提取分离方法,对液质联用测定方法中色谱条件、质谱条件进行了优化。方法学考察结果表明该方法具有专属性好、准确度高、精密度好和灵敏度高等特点,本方法适用于血根碱、二氢血根碱、白屈菜红碱以及二氢白屈菜红碱的在动物组织中的含量测定。2、对未饲喂任何饲料添加剂的三月龄肉鸡单次给予灌胃高、中、低浓度分别为(30mg.kg-1)、(15mg.kg-1)、(10mg.kg-1)剂量的血根碱,用所建立的HPLC-MS/MS方法检测血浆中各时点的血根碱及其代谢物二氢血根碱的血药浓度,得到药-时曲线,结果用DAS3.0软件分析得到血根碱以及二氢血根碱在鸡体内的药代动力学参数。结果显示,肉鸡灌胃血根碱后,血根碱以及二氢血根碱的药时曲线呈一定的规律,两者的血药浓度、血药浓度时间曲线下面积AUCo-t则均随灌胃给药剂量的增大而增大,呈线性相关；而从血根碱及其代谢物二氢血根碱的药时曲线可看出：两者在鸡体内达到最大血药浓度的时间相当,而代谢物二氢血根碱的血药浓度远大于血根碱的血药浓度。3、对一周龄的仔鸡饲喂添加了30mg.kg-1美佑壮的饲料,连续饲喂100天后,进行不同时间段的停药,应用所建立的HPLC-MS/MS对停药后鸡组织中的血根碱、二氢血根碱、白屈菜红碱以及二氢白屈菜红碱进行检测,对鸡不同组织中的四种生物碱的残留进行检测分析,来评价其安全性。结果显示,在鸡体内检测到血根碱、二氢血根碱、白屈菜红碱以及二氢白屈菜红碱的含量很低,说明在长期饲喂添加博落回提取物散的饲料后,血根碱在鸡体内有一定的残留量,但在停药7天后,在鸡体内检测不到几种生物碱的存在,这表明长期饲喂添加博落回提取物散的饲料的鸡,具有很好的使用安全性,对于博落回提取物作为药物饲料添加剂的安全性评价提供有效的技术支持。