卵泡刺激素(follicular stimulating hormone，FSH)是一种由动物脑垂体前叶分泌的糖蛋白类促性腺激素，FSH在动物生殖过程中起至关重要的作用。本试验参考了GenBank中猪FSH的α、β亚基的基因序列，设计合成了两对引物，从猪的脑垂体中抽提总的RNA，然后通过RT-PCR扩增出片段大小约为363bp和390bp的α、β亚基基因，然后克隆到pMD18-T Simple Vector中，将重组质粒鉴定后进行序列测定，应用DNASTAR分析软件将克隆的FSH基因与GenBanK中己发表的其它FSH基因进行核苷酸及其推导氨基酸同源性进行比较，结果表明：猪FSHα、β核苷酸与其它物种如牛，羊，犬，猫，梅花鹿，虎等的同源性在93％左右，但在猪之间的FSH α、β同源性高达99％；猪FSH α、β氨基酸与其它物种如牛，犬，猫，梅花鹿等的同源性在92％左右，而在猪之间的FSH α、β同源性高达98％，表明了猪FSH的α、β基因已经成功克隆。 将重组质粒pMD18-T-α，pMD18-T-β和腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV vector用Bgl Ⅱ和EcoR Ⅴ双酶切；然后再将酶切产物连接，分别构建含有α、β亚基基因的腺病毒穿梭质粒，对其进行酶切鉴定分别成功获得7500bp和363bp以及7500bp和390bp大小的特异性条带，将构建好的阳性腺病毒穿梭质pShuttle- α，pShuttle-β用Pme Ⅰ线性化；再将其与含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态大肠埃希氏菌BJ5183进行同源重组，分别构建含有α，β亚基基因的同源重组腺病毒载体，对其进行酶切鉴定也分别成功获得30kb和3.0kb两特异性条带以及约30kb和4.5kb两特异性条带；将阳性同源重组腺病毒载体转化到XL-10 GOLD超级感受态细胞进行扩大培养。然后提取阳性同源重组的腺病毒载体用Pac Ⅰ线性化后分别转染AD-293细胞，一周后观察到细胞的病变。 本试验在国内首次克隆出了猪FSH的α、β亚基基因，并将α、β亚基基因分别定向插入到了腺病毒穿梭质粒之中，成功构建了含有猪α、β亚基基因的腺病毒穿梭质粒，继而也成功同源重组了含有猪α、β亚基基因的重组腺病毒载体，最终也引起了AD-293细胞的病变，在其细胞中得到了初步表达。通过对猪FSH的α、β亚基基因重组腺病毒载体构建的探索为今后猪FSH基因工程产品的研制奠定了基础。