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目的本研究采用西罗莫司(Sirolimus)处理体外培养的肾透明细胞腺癌786-O细胞株,观察药物对细胞增殖,细胞周期和细胞凋亡,以及MDR1和Survivin mRNA表达方面的影响。方法1.体外培养人肾癌786-O细胞株。细胞以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基于37℃、5%CO2、95%饱和湿度条件下的孵箱中培养,每周传代2次;用不同浓度的Sirolimus处理人肾癌786-O细胞株,同时设对照组。2. MTT法检测细胞增殖变化。取生长分数约70%-80%的786-O细胞进行消化,以2000个/孔接种于96孔培养板,放回孵箱培养,24小时后加入不同浓度的Sirolimus(终浓度为6.25nmol/l, 12.5nmol/l, 25nmol/l,50nmol/l),继续培养48小时,四氮唑盐(噻唑蓝,MTT)还原法检测细胞增殖变化。3.采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化。细胞经24小时培养后,加入不同浓度的Sirolimus(终浓度为12.5nmol/l),继续培养24小时,消化收集细胞总数106个以上,PBS洗涤、重悬后流式细胞仪法检测细胞周期和细胞凋亡变化。4. RT-PCR法检测MDR1和Survivin mRNA的表达。细胞经24小时培养后,加入不同浓度的Sirolimus(终浓度为6.25nmol/l, 12.5nmol/l, 25nmol/l,50nmol/l),继续培养24小时,消化收集细胞总数106个以上,RT-PCR法检测MDR1和Survivin mRNA的表达变化。结果1. Sirolimus抑制786-O细胞的增殖(P﹤0.05);且随药物浓度的升高,抑制作用增强(P﹤0.05)。2. Sirolimus导致786-O细胞生长停滞在G1/S期(P﹤0.01),无诱导细胞凋亡效应。3. Sirolimus减少MDR1和Survivin mRNA的表达(P﹤0.01);且随药物浓度的递增,减少表达作用增强(P﹤0.01)。结论Sirolimus能抑制体外培养的786-O细胞的增殖,能产生细胞周期G1/S停滞效应,无诱导细胞凋亡作用;能下调MDR1和Survivin mRNA的表达。