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胆管细胞癌是一种起源于胆道上皮细胞的致命性恶性肿瘤，目前的治疗手段疗效均欠佳。bcl-2癌基因是一种抗凋亡基因，该基因及其蛋白的超表达可抑制多种因素诱导的细胞凋亡，使细胞寿命延长。近年来研究发现胆管癌细胞中bcl-2癌基因蛋白表达阳性率较高，这可能与其不良的愈后密切相关。本实验利用合成的切割bcl-2 mRNA核酶基因，降低胆管癌细胞内bcl-2的表达水平及抗凋亡作用，进而诱导其发生凋亡。 我们首先将切割bcl-2 mRNA核酶基因用BamH Ⅰ+EcoR Ⅰ双酶切从pGEM-3Zf（-）RZ质粒中切下，电洗脱法回收核酶基因片段；真核表达载体pDOR-neo经双酶切后，在T4DNA连接酶作用下，完成与核酶基因的重组；重组后的载体进行酶切鉴定。然后，采用脂质体Lipofectamine介导的DNA转染法，将重组后含有切割bcl-2 mRNA核酶基因的真核细胞表达载体pDOR-RZ导入人胆管癌细胞系QBC939细胞内；通过原位杂交、斑点杂交、光镜、透射电镜、扫描电镜、流式细胞仪、免疫细胞化学、DNA电泳及TUNEL法等手段观察目的基因的转染、转录和该细胞的bcl-2表达水平及凋亡情况；并通过阿霉素的不同