本文分为以下两个章节进行探讨：　　第一章 精液优选对精子DNA碎片的影响及其对IVF/ICSI胚胎发育的影响　　研究目的：　　1.旨在评估密度梯度离心联合上游法改善精子DNA碎片率的效率及对IVF/ICSI胚胎发育的影响.　　2.比较精子畸形率、精子前向运动及精子DNA碎片与IVF妊娠结局的相关性.　　3.研究抗氧化剂治疗是否可以改善精液参数.　　研究方法：　　收集120份IVF和40份ICSI密度梯度离心联合上游法处理前后的精液,其中20个IVF取消新鲜移植,按照WHO标准对精液进行常规分析和精子染色质扩散实验检测精子DNA碎片,并收集IVF/ICSI临床和实验室数据;另外收集59份抗氧化剂治疗前后的样本,检测各精液参数.根据SCD检测的精子DNA碎片率分组:低水平DNA碎片组(DFI<20)和高水平碎片组(DFI≥20);精子畸形率以96%为阈值分为正常组和畸精组;精子活动力以(A+B)%>50%分为活动力正常组和弱精组.　　研究结果：　　1、密度梯度离心联合上游法处理后,用于IVF授精的精液标本的精子密度由61.97±30.12下降到15.12±19.51;精子畸形率由96.15±3.88降至90.95±3.91;精子DNA碎片则由28.77±7.39降至13.50±11.55;而用于ICSI授精的精液标本的畸形率由97.60±3.28降至96.64±4.49,精子密度由22.55±22.23降至6.01±4.59,精子DNA碎片则由39.45±10.29下降到19.89±12.55,另外精子前向运动则由24.13±14.77提高到70.88±22.28,差异均有统计学意义.　　2、优选前后的精子DNA碎片率与优选前精子前向运动率(r=-0.413;p=0.000)和优选后精子前向运动(r=-0.492;p=0.000)成负相关;但与男性年龄、不孕年限、体重指数、密度、畸形率、受精率、2PN受精率、优胚率、卵裂率等参数均无明显相关性.　　3、优选后,IVF组DNA碎片高水平组(DFI≥20)的第三天胚胎含6-20%碎片率胚胎百分率明显高于DNA碎片低水平组(DFI<20),且含碎片率<5%的胚胎百分率低于DNA碎片低水平组(DFI<20);而ICSI组DNA碎片高水平组(DFI≥20)的第三天胚胎含6-20%和21-50%碎片的胚胎百分率明显高于DNA碎片低水平组(DFI<20),且含碎片率<5%的胚胎百分率低于DNA碎片低水平组(DFI<20),差异均有统计学意义.　　4、IVF和ICSI的临床妊娠组中除处理后的精子DNA碎片率明显低于未妊娠组之外(p<0.05),两组在男方年龄、女方年龄、不孕年限、获卵数、移植数、受精率、卵裂率、可用胚胎率及、优选前后的密度、优选前后精子前向运动百分率及精子畸形率之间均无明显差异(p>0.05);优选后精子DNA碎片预测IVF-ET临床妊娠的ROC曲线下面积是0.667,95%的置信区间是0.558-0.776(p=0.006),优选后精子DNA碎片对ICSI-ET临床妊娠的ROC曲线分析,AUC是0.725,(95%CI,0.553-0.897)(p=0.016).　　5、密度梯度离心联合上游法处理后ICSI/IVF精子DNA碎片低水平组的妊娠率和出生率均明显高于高水平组(p<0.05).　　6、畸精组的种植率和出生率明显低于正常组,差异有统计学意义,妊娠率有差别但无统计学意义,畸精组和形态正常组第三天胚胎质量无明显差异.　　7、弱精组与活动力正常组在IVF的胚胎质量和胚胎发育相关参数之间并无明显差异.　　8、使用抗氧化剂治疗后,精子DNA碎片由36.27±10.09下降到21.73±7.93,精子前向运动由52.29±16.20降为43.76±10.46,差异有统计学意义,治疗前后精子畸形率之间无明显差异.　　研究结论：　　1、密度梯度离心联合上游法可以明显减少精液的DNA碎片,有效回收高活动力、形态正常,DNA碎片少的精子,改善精液质量.　　2、精液中的DNA碎片会影响第三天的胚胎质量,优选后精子DNA碎片对IVF/ICSI临床妊娠具有一定的预测价值.虽然密度梯度离心联合上游法可以减少DNA碎片,但作用有限,一旦优选后精液中的DNA碎片超过阈值,即使可以正常受精,但也会导致IVF/ICSI妊娠率和出生率下降.　　3、精子畸形率会导致IVF出生率下降,但对第三天胚胎质量无明显影响;精子前向运动则与IVF胚胎质量和胚胎发育均无明显相关性.　　4、抗氧化剂治疗可以降低精子DNA碎片率.　　第二章 精子CASA参数在IVF中的应用价值　　研究目的：　　1、研究密度梯度离心前后CASA参数对IVF-ET的妊娠结局的预测价值　　2、研究计算机辅助精子分析参数与不育男性精子DNA碎片的关系　　研究方法：　　根据入选对象标准收集本院2016年3-6月行IVF-ET治疗的100个不孕不育夫妻的相关资料,利用计算机辅助精子分析系统进行常规精液分析和染色质扩散法检测精液的DNA碎片,收集100个新鲜移植周期的临床妊娠结果.　　研究结果：　　1、IVF-ET治疗的妊娠和非妊娠两组之间的CASA参数并无明显差异.　　2、优选前,精子DNA碎片率与精子前向运动率、平均路径速度、侧摆幅度、平均直线运动速度、曲线速度、精子平均鞭打频率成负相关;优选后,精子前向运动、平均路径速度、侧摆幅度、曲线速度与精子DNA碎片率成负相关,但优选前后的SDFI均与LIN、STR等参数无明显相关性.　　3、处理前后DFI高水平组(DFI≥20)的前向运动率、曲线速度、平均路径速度、侧摆幅度与低水平组(DFI<20)相比都明显下降,差异有统计学意义;ROC曲线分析数据显示,处理前各参数AUC分别是0.873、0.713、0.769、0.618;优选后各参数AUC分别是0.782、0.681、0.649、0.656.　　研究结论：　　尽管计算机辅助精子分析参数无法预测IVF-ET的妊娠结局,但其与优选前后的精子DNA碎片具有相关性,精子DNA碎片会导致精子运动活力参数(前向运动率、曲线速度、平均路径速度)和空间位移程度参数(侧摆幅度)下降,但对精子运动方式无明显影响,精子前向运动率和平均曲线运动速度对DNA碎片水平的评估具有参考价值.