研究背景：　　随着生活水平的提高，人们的饮食结构和生活习惯发生改变，我国超重及肥胖人口急剧增加，肥胖已成为威胁人们健康的主要疾病之一。其中，女性的生殖健康受到肥胖的严重影响。美国一项研究指出青春期女性肥胖症患者多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome,PCOS）和不孕的发病率增加[1]。　　不仅如此，肥胖还影响不孕女性的临床结局。患有肥胖症的不孕女性早期流产[2,3]、早产[4][5]等不良妊娠事件发生率升高，肥胖对孕妇本身和胎儿均造成极大的影响。对于肥胖不孕患者，目前提倡接受不孕治疗的同时改变生活方式，积极控制体重，以获得较好的临床治疗结局[6]。　　控制性超促排卵（COH）是不孕患者进行不孕治疗过程中的关键性步骤，主要是利用外源性促性腺激素FSH作用于卵巢颗粒细胞，刺激卵巢颗粒细胞分泌雌二醇，促进颗粒细胞增殖、卵泡发育和卵母细胞成熟。在促排卵过程中，发现肥胖不孕患者对促排卵药物反应性降低，主要表现为促排卵药物使用量增大，促排卵药物使用时间延长，扳机日雌激素水平低，获卵数减少。但目前肥胖影响促排卵药物反应性的机制仍不明确。　　FSH作用的发挥需要与颗粒细胞膜上的FSH受体结合后激活受体后信号通路，促进FSH靶基因表达，激活芳香化酶，促进颗粒细胞合成分泌雌激素。因此可通过研究肥胖不孕患者颗粒细胞FSHR及受体后信号通路的表达情况，了解肥胖患者卵巢颗粒细胞对促排卵药物反应性下降的原因。　　肥胖症患者体内多出现各种代谢紊乱，其中血胰岛素水平较正常BMI人群高，出现一定程度的胰岛素抵抗。那么肥胖患者卵泡微环境是否发生改变，卵泡微环境改变是否影响颗粒细胞对FSH的反应性？　　综上所述，本课题拟通过研究肥胖不孕患者颗粒细胞FSH及其受体下游信号通路及卵泡微环境改变对卵巢反应性的影响阐明女性肥胖不孕患者对促排卵药物反应性下降的机制。　　第一部分 不同BMI女性不孕患者对促排卵药物反应性比较　　研究目的：　　通过临床数据分析，肥胖是否影响卵巢对促排卵药物反应性。　　研究方法：　　本研究将2013年1月-2016年12月于广州医科大学附属第三医院生殖中心接受IVF治疗，年龄为29-32岁，使用长效长方案促排卵的女性不孕患者纳入研究，回顾性分析不同BMI不孕患者的促排卵药物反应性。根据我国《成人超重和肥胖症预防与控制指南》中对肥胖界限的定义，将患者分为三组：正常组（18.5≤BMI＜24）、超重组（24≤BMI＜28）及肥胖组（BMI≥28）。主要观察指标包括：促排卵药物起始剂量、促排卵药物用药量、单位体表面积促排卵药物用药量、促排卵药物使用时间、扳机日雌激素水平、雌激素增长幅度、单位用药雌激素增长幅度、获卵数。　　研究结果：　　本研究共纳入2938例不孕患者。三组患者的平均年龄、基础孕激素水平无显著性差异。基础FSH、LH、E2及AMH水平随BMI增高而减小。　　随着BMI的增加，促排卵药物启动剂量、促排卵用药天数、总用药量及单位体表面积平均用药量不断增加，HCG日雌激素水平、雌激素增长幅度、单位用药量雌激素增长幅度、HCG日超声监测大于18mm的卵泡数及获卵数随BMI增加而减少。　　简而言之，肥胖不孕患者单位体表面积促排卵药物用药量大、雌激素增长速度慢、主导卵泡数目和获卵数少。　　研究结论：　　1.随着BMI增加，卵巢对促排卵药物反应性下降。　　2.肥胖影响促排卵药物反应性。　　第二部分 肥胖患者卵巢颗粒细胞FSH受体及受体后信号通路表达情况　　研究目的：　　通过探讨肥胖不孕患者卵巢颗粒细胞FSHR及受体后信号通路表达情况研究肥胖患者对促排卵药物反应性下降的机制。　　研究对象　　收集到我院生殖中心接受IVF治疗，年龄为29-32岁，使用长效长方案促排卵的女性不孕患者的卵泡液。根据不同BMI分为三组：正常组（18.5≤BMI＜24）、超重组（24≤BMI＜28）及肥胖组（BMI≥28）。　　研究方法：　　以正常组为对照，比较超重组和肥胖组FSHR表达水平及受体后信号通路（PKA、Akt2、CYP19A1）表达情况以及卵泡液雌激素水平。　　研究结果：　　肥胖不孕患者颗粒细胞FSHR、PKA、Akt2、CYP19A1表达水平降低。肥胖不孕患者卵泡液中雌激素水平降低。　　研究结论：　　肥胖不孕患者颗粒细胞FSHR表达下降及FSHR下游信号通路受阻，影响颗粒细胞雌激素合成，对促排卵药物反应性下降。　　第三部分 肥胖影响卵巢颗粒细胞对FSH反应性的机制研究　　研究目的：　　探讨肥胖影响卵巢颗粒细胞对FSH反应性的机制，胰岛素抵抗对FSHR表达水平的影响。　　研究方法：　　不同浓度胰岛素培养KGN细胞，构建胰岛素抵抗细胞模型后使用低剂量重组FSH刺激细胞。收集细胞进行Western Blotting，检测FSHR、PKA、Akt2、CYP19A1以及培养基雌激素水平。　　研究结果：　　高浓度胰岛素处理后，KGN细胞FSHR、CYP19A1、Akt2表达量逐渐下降，培养基雌激素浓度逐渐降低，葡萄糖浓度逐渐升高。　　研究结论：　　高浓度胰岛素培养的KGN细胞发生不同程度胰岛素抵抗，FSHR表达下调，下游PKB信号通路受阻，影响KGN细胞对FSH的反应性，雌激素合成能力减弱。