小豆蔻明诱导HL-60细胞凋亡及其机制的研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woshishouhushen
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目的通过严格的体外实验,研究小豆蔻明诱导HL-60(急性早幼粒白血病细胞株)凋亡过程中Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白的变化。探讨不同浓度小豆蔻明对HL-60细胞增殖、凋亡的影响以及其诱导HL-60细胞凋亡的最佳浓度。期望寻找一种新药可减轻白血病患者症状,延长患者生存期,提高患者生存质量。方法①光镜下观察四个浓度小豆蔻明诱导HL-60细胞凋亡的形态学变化;②流式细胞仪检测四个浓度小豆寇明作用后48h细胞凋亡率。③Western Blot方法检测四个浓度小豆寇明作用48h后Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达情况。结果①光镜下观察四个浓度小豆蔻明(2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL)均能抑制HL-60细胞增殖及诱导HL60细胞凋亡,且呈浓度效应依赖关系,随着小豆蔻明浓度增加其抑制作用增强。②流式细胞术检测凋亡细胞表明小豆蔻明能诱导HL-60细胞凋亡,并呈浓度效应依赖关系。四个浓度(2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL)小豆蔻明作用48h后,细胞凋亡率分别为(30.0±1.3)%、(51.0±6.9)%、(83.4±4.1)%(95.1±3.9)%,有统计学意义(P<0.05)。③Western Blot表明小豆蔻明可下调细胞凋亡的负性调节基因Bcl-2蛋白表达,上调细胞凋亡促进基因Bax、Caspase-3蛋白的表达,并且呈浓度效应依赖关系,从而诱导肿瘤细胞的凋亡。结论小豆蔻明通过上调HL-60细胞Bax、caspase-3蛋白的表达水平,降低Bcl-2蛋白的表达水平,抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞的凋亡,且呈一定的浓度效应依赖关系。
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