人巨细胞病毒感染的信号转导途径与细胞病变研究

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人巨细胞病毒(HCMV)作为机会感染病毒已成为器官移植、爱滋病等免疫性疾病的重要致死原因,HCMV活动性感染可以通过胎盘垂直传播导致流产、畸形、死胎、新生儿神经系统及其它脏器的损害.全文共分四部分.第一部分,HCMV感染核转录因子NF-kB活化与bcl-2 mRNA表达的意义.该文彩免疫组化和Wester blot方法检测HCMV AD169株感染人胚肺成纤维细胞(HEL)组核转录因子NF-kB蛋白的表达及其抑制因子I-kBα的变化,应用原位杂交方法检测感染组与正常对照组细胞中NF-kBP65及bcl-2的表达情况;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析HCMV晚期基因的表达,同时采用流式细胞术检测两组细胞的凋亡指数.第二部分,一氧化氮与孕早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的关系.该文选取81例既往有异常妊娠史行人工流产术的早孕妇女,应用RT-PCR检测绒毛组织HCMV-mRNA的表达;ELISA法测定血清HCMV-IgM;原位杂交检测蜕膜巨嗜细胞iNOS-mRNA的表达并行定量分析.第三部分,体外感染后巨细胞病毒晚期mRNA表达与细胞病变相关性.采用半定量RT-PCR检测HCMV AD169株感染人胚肺成纤维细胞后不同时间HCMV晚期mRNA的表达水平,同时动态观察CPE的改变,电镜下观察细胞结构变化的特点.第四部分,中药"金叶败毒颗粒"对HCMV感染丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)p38信号通路的调节.应用原位杂交方法检测中药"金叶败毒颗粒"干预后感染细胞MAPKp38及NF-kB P65 mRNA表达水平.
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