石蒜碱和黄蝶呤表面分子印迹聚合物的制备、表征及应用研究

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分子印迹技术(molecular imprinting technique,MIT)指的是将模板分子与功能单体在一定的条件下通过共价或者非共价作用形成孔状聚合物的一门技术。分子印迹聚合物在空间结构上有与模板分子一致的空穴,因此对模板分子具有特定的吸附识别能力。分子印迹技术已经在固相萃取、膜分离、色谱分离、生物传感器及药物分析领域得到了广泛的利用。表面分子印迹技术指的是分子印迹聚合发生在基质表面,然后使得印迹聚合物的空间空穴处于聚合物的外层,印迹聚合物对模板分子的识别位点也包埋在基质的表面,在表面进行吸附识别的一种技术。分子印迹固相萃取(molecularly imprinted solid-phase extraction,MISPE)是将分子印迹聚合物作为固相萃取的吸附剂来富集纯化目标分子的一种方法。基于分子印迹聚合物的高选择性吸附特点,分子印迹固相萃取能够更高效地从复杂样品中分离富集目标分子,提高了分析的精确度和准确性。在中药、天然产物或者生物样品活性成分的分离纯化中起着重要的作用。本文选取了与肿瘤有着密切关系的石蒜碱以及黄蝶呤作为研究对象。石蒜碱能够对肿瘤细胞起到抑制作用,具有一定的临床研究价值。黄蝶呤作为癌症的潜在标志物,在癌症的诊断中起着重要的作用。但是由于石蒜碱在文殊兰中和黄蝶呤在癌症小鼠尿液中的含量比较低,一般的分离方法比较困难。本文针对中药提取物以及生物样品中有效成分含量低的问题,提出了用分子印迹技术结合固相萃取的方法对其进行分离纯化。主要进行以下几个方面的研究:1.将二氧化硅纳米粒子作为合成表面分子印迹聚合物的基质,合成具有核壳型的石蒜碱分子印迹纳米微球,通过透射电镜扫描及红外光谱对其进行表征,结果表明了石蒜碱分子印迹聚合物的制备成功。考察其吸附平衡及吸附动力学,并通过Scatchard分析说明了分子印迹聚合物在吸附的过程中有两类吸附位点,印迹因子为2.5。将其作为固相萃取的填料来富集纯化文殊兰中的石蒜碱,结果表明分子印迹聚合物对目标分子有特异识别的能力。为中药复杂成分中微量有效成分的分离纯化提供了新的研究方法。2.在二氧化硅纳米粒子表面进行乙烯基化修饰,红外光谱显示修饰成功。以黄蝶呤为模板合成表面分子印迹微球,透射电镜扫描表明微球制备成功。其吸附性能结果显示印迹因子为7.8,表明表面分子印迹微球对黄蝶呤具有特异性吸附。将其作为固相萃取的填料,采用高效液相色谱-荧光检测法来富集检测荷瘤小鼠尿液中的黄蝶呤,为生物样本中目标分子的检测提供新的检测方法。
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