研究背景:糖尿病神经病理痛（Diabetic neuropathic pain,DNP）是糖尿病神经病变中危害较大的一个常见并发症,通常表现为下肢远端皮肤烧灼样的疼痛,糖尿病患者的疼痛或神经损伤症状的发生率随年龄和病程增长而升高。严重的DNP还可伴有焦虑或者抑郁（Depression,DP）。与其它糖尿病并发症相比,DNP是DP的一个比较重要的危险因素,并且可以加重DP的症状,DP和DNP之间存在相互促进病情进展的作用,DNP并发DP严重影响患者生活质量。目前临床尚缺乏针对DNP合并DP有效的治疗药物。P2X₇是嘌呤能受体家族的成员之一,ATP可通过激活P2X₇受体产生疼痛,在神经炎症通路中发挥重要作用,并可参与抑郁症状的产生,神经系统的胶质细胞中的P2X₇受体是DNP及DP共病的重要靶点。二氢杨梅素（Dihydromyricetin,DHM）具有抗氧化、抗炎等多种药理作用,并可缓解神经损伤。目的:本研究通过建立DNP合并DP大鼠模型,观察DHM对DNP合并DP大鼠的影响,探索其可能的作用机制,拓宽和深化对DHM作用和机制的认识,为防治DNP合并DP探索新方法。方法:将SD大鼠随机分成六组:正常对照组（Control组）、正常和二氢杨梅素组（Control+DHM组）、模型组（DNP+DP组）、模型和二氢杨梅素组（DNP+DP+DHM组）、模型和P2X₇ shRNA组（DNP+DP+P2X₇ shRNA）组、模型和scramble shRNA组（DNP+DP+scramble shRNA）组。建立DNP合并DP大鼠模型,通过足底机械缩足反射阈值（Mechanical withdrawal threshold,MWT）、热缩足反射潜伏期（Thermal withdrawl latency,TWL）监测大鼠痛行为的变化,通过糖水偏好实验（Sucrose preference test,SPT）、强迫游泳实验（Forced swimming test,FST）和旷场实验（Open-field test,OFT）监测大鼠抑郁行为的变化。通过实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR,qPCR）和蛋白印迹（Western blot）法来检测各组大鼠背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）以及脊髓（Spinal cord,SPI）中P2X₇受体、TNF-α和IL-1β的表达。采用免疫组化方法测定各组大鼠DRG以及SPI中P2X₇受体的表达,并通过免疫荧光双标的方法来检测大鼠DRG以及SPI中P2X₇受体与GFAP共表达的情况。采用ELISA检测各组大鼠血清中炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的表达变化情况。采用蛋白印迹法检测大鼠DRG以及SPI中ERK1/2及其磷酸化程度的变化。结果:1、DNP合并DP大鼠模型建立成功,与Control组相比,DNP+DP组大鼠的MWT、TWL、SPT和OFT值显著降低,FST不动时间显著升高（p<0.01）,在给予DHM或P2X₇ shRNA处理后,DNP+DP+DHM组和DNP+DP+P2X₇ shRNA组大鼠的MWT、TWL、SPT和OFT值较DNP+DP组明显升高,FST不动时间显著降低（p<0.01）。2、P2X₇测定结果:采用qPCR、Western blot、免疫组化以及免疫荧光双标法检测各组大鼠DRG和SPI中P2X₇受体表达情况。测定结果表明,与Control组相比,DNP+DP组大鼠DRG和SPI中P2X₇受体表达水平明显升高（p<0.01）;给予DHM或P2X₇ shRNA处理后,DNP+DP+DHM组和DNP+DP+P2X₇ shRNA组DRG以及SPI中P2X₇受体表达水平较DNP+DP组明显降低（p<0.01）。3、TNF-α和IL-1β测定结果:DNP+DP组大鼠DRG和SPI中TNF-α和IL-1β表达水平较Control组明显升高（p<0.01）;经过DHM或P2X₇ shRNA的处理后,DNP+DP+DHM组和DNP+DP+P2X₇ shRNA组DRG以及SPI中TNF-α和IL-1β水平较DNP+DP组明显降低（p<0.01）。4、p-ERK1/2测定结果:用Western blot法检测各组大鼠DRG以及SPI中p-ERK1/2的表达变化。检测结果表明:各组大鼠DRG以及SPI中总ERK1/2和β-actin的比值无统计学差异（p>0.05）;DNP+DP组大鼠DRG以及SPI中p-ERK1/2和ERK1/2的比值较Control组显著升高,模型大鼠ERK1/2磷酸化程度显著增强（p<0.01）;与DNP+DP组大鼠相比,给予DHM或者P2X₇ shRNA的治疗后,DNP+DP+DHM组和DNP+DP+P2X₇ shRNA组大鼠DRG以及SPI中p-ERK1/2表达水平显著降低（p<0.01）。结论:通过DHM的处理,DNP合并DP大鼠的疼痛和抑郁样行为得到缓解,此效果与P2X₇ shRNA一致,其可能的作用机制为:DHM可降低DRG以及SPI的P2X₇受体表达,下调ERK1/2磷酸化水平,降低炎性因子TNF-α和IL-1β表达水平。