比例计量型多硫化氢荧光探针的构建及其性质研究

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硫化氢(H2S)作为人体内重要的气体信号分子,在生命过程中扮演着重要的角色。在生理环境下,H2S极易被活性氧物种(reactive oxygen species,ROS)等氧化成为多硫化氢(H2Sn,n>1),因此,体内H2S动态平衡的检测主要是检测H2S及H2Sn的存在。荧光探针检测具有实时检测、灵敏度高、选择性好、线性范围宽、易于操作等优点,在生命科学和医药等各个领域引起了广泛的关注和研究。为实现对H2Sn的精准检测,本文在比例计量型H2Sn荧光探针的构建及应用方面开展了以下两个方面的工作:1.选用氟硼吡咯荧光分子(BODIPY)为荧光团,基于分子内电荷转移(Intromolecular Charge Transfer,ICT)机理,以2-氟-5-硝基苯甲酸酯作为H2Sn的响应基团设计合成了荧光探针RP-A。测试结果显示,与其他生物相关物种(如RNS、ROS、RSS和其他离子)相比,探针RP-A对H2Sn的检测,除具有高选择性、高灵敏度、响应迅速等优势外,还有着明显的比例计量响应特点。通过高效液相色谱和紫外光谱等手段,验证了探针RP-A与H2Sn分子的反应机理,解释了在具体响应过程中探针所发生的光物理性质变化。通过计算,得出探针RP-A与H2Sn反应的拟一级速率常数为0.071 min-1,检测限为57 nM。此外,通过激光共聚焦荧光显微镜成像实验证实了探针RP-A在HeLa细胞中对H2Sn的成像能力。2.以异佛尔酮为荧光母体、2-氟-5-硝基苯甲酸酯为响应基团构建了具有ICT结构的远红光发射H2Sn荧光探针RP-B。探针对H2Sn分子的比例计量响应检测,表现出高灵敏度、高选择性等特点。通过计算,得出RP-B与H2Sn反应的拟一级速率常数为0.096 min-1,检测限为43 nM。通过激光共聚焦荧光显微镜成像实验证实了探针RP-B在HeLa细胞中对H2Sn的远红光比例计量成像能力。
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