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灵芝(Ganoderma lucidum)是一种珍贵的药用真菌,在我国已有两千多年的应用历史。灵芝孢子是灵芝的卵形生殖细胞,主要含有多糖、三萜、核苷等活性成分,其中多糖成分具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等多种药理作用。目前市场上灵芝孢子粉产品基本上均采用破壁工艺处理,破壁后灵芝孢子粉多糖得率得到有效的提高,但破壁前后多糖究竟有哪些差异目前还不清楚,因此本研究通过对未破壁灵芝孢子粉多糖和破壁产生的胞壁多糖进行分离纯化和结构鉴定,阐明灵芝孢子粉破壁前后多糖差异,为灵芝孢子粉多糖的应用建立基础。本研究的主要研究结果如下:(1)分别对沪农灵芝1号未破壁灵芝孢子粉和水提后破壁孢子粉进行沸水提取和分级醇沉,比较这两部分提取物的得率、分子量分布、多糖含量、?-葡聚糖含量、蛋白含量和单糖组成。结果发现,分级醇沉法可以有效地对未破壁灵芝孢子粉水提物和胞壁水提物进行分级分离;未破壁灵芝孢子粉水提物和胞壁水提物的多糖和?-葡聚糖主要集中在50%和70%的醇沉部分,两部分得率较高,多糖含量均高于50%,且多糖以?-葡聚糖为主,但两部分的单糖组成存在明显差异。(2)运用离子交换层析和凝胶层析对灵芝孢子粉水提物分级醇沉组分进行分离纯化,从未破壁灵芝孢子粉水提物中分离纯化获得5个均一多糖,从胞壁水提物中获得2个均一多糖。通过糖含量、蛋白含量、分子量和单糖组成分析测定,发现7个均一多糖中有3个为葡聚糖,4个主要为杂多糖。(3)通过单糖组成分析、甲基化分析、红外光谱和核磁共振谱解析出其中1个未破壁灵芝孢子粉多糖和2个胞壁多糖的化学结构,3个均一多糖都是葡聚糖,但其糖残基的比例和连接方式不同。GLSB50A-Ⅲ-1是由→3,6)-?-D-Glcp-(1→、→3)-?-D-Glcp-(1→、→4,6)-?-D-Glcp-(1→、→4)-?-D-Glcp-(1→和→6)-?-D-Glcp-(1→五种糖残基构成主链,由?-D-Glcp-(1→构成支链的葡聚糖,其化学结构为:GLSW50A-Ⅰ是由→3)-?-D-Glcp-(1→、→3,6)-?-D-Glcp-(1→、→4,6)-?-D-Glcp-(1→和→6)-?-D-Glcp-(1→四种糖残基构成主链,由?-D-Glcp-(1→和?-D-Glcp-(1→4)-?-D-Glcp-(1→构成支链的葡聚糖,其化学结构为:GLSW50A-Ⅱ和GLSW50A-Ⅰ的主链以及支链糖残基类型一样,但是具体结构存在差异,其化学结构为: