人参皂苷Rg3对裸鼠移植性宫颈癌治疗作用的实验研究

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目的:本实验通过建立子宫颈癌裸鼠病理模型后,以此为研究对象,运用光镜、免疫组化及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术,观察人参皂甙Rg3[20(R)—Ginsenoside Rg3]和顺铂单独及二者联合应用对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤生长的影响,重点研究肿瘤的生长、肿瘤细胞的凋亡及PCNA、CD31的表达情况,以期从细胞及分子水平揭示人参皂甙Rg3和顺铂单独及二者联合应用对人宫颈癌Hela细胞的作用机制,为临床上药物治疗与预防宫颈癌寻找更加完善的途径。方法:28只BALB/c-nu裸鼠皮下注射接种已培养配置好的Hela单细胞悬液,14天后移植瘤形成,荷瘤动物模型建立。裸鼠称重后随机分成四组(每组7只),(1)对照组:0.5ml生理盐水灌胃,每日一次;(2)顺铂组:剂量为5mg/kg的顺铂0.5ml,腹腔内注射,每4天一次;(3)人参皂甙Rg3组:剂量为5mg/kg人参皂甙Rg3 0.5ml灌胃,每日一次;(4)人参皂甙Rg3与顺铂联合组:剂量为5mg/kg的人参皂甙Rg3 0.5ml灌胃,每日一次,并给于剂量为5mg/kg的顺铂,腹腔内注射,每4天一次;各组用药时间均为5周。观察裸鼠一般情况,进行肿瘤生长监测;末次用药24小时后处死裸鼠,检测肿瘤瘤重、体积、裸鼠体重,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率;并采用免疫组织化学S-P法测定肿瘤组织CD31,PCNA的表达情况及用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:对照组裸鼠肿瘤迅速生长,生长曲线较陡直;顺铂组肿瘤生长延缓(P<0.01),在较长一段时间内肿瘤生长很缓慢;人参皂甙Rg3组较对照组肿瘤生长延缓,抑制作用较持久(P<0.01),与顺铂组相当;联合组的抑瘤效果较其各自单独应用时更为明显(P<0.001),肿瘤生长曲线低平。用药后对照组、Rg3组、Rg3与顺铂联合治疗组的裸鼠随鼠龄的增长,体重增加,而顺铂组的裸鼠体重明显降低(与其他组比较P<0.05,差异有显著性意义)。顺铂组、Rg3组及联合组平均瘤重明显较对照组轻,差异有显著性(P<0.05)。Rg3组与顺铂组,联合组之间无显著性差异(P>0.05);各组抑瘤率分别为Rg3组为49.5%,顺铂组为56.0%,联合组为61.2%。除对照组外,各治疗组肿瘤组织MVD均下降。Rg3组的MVD明显低于对照组(P<0.01),也低于顺铂组(P<0.05);联合组治疗后,MVD降低最为明显。对照组PCNA表达明显高于实验组,其次是顺铂组及Rg3组,联合治疗组表达最少;而且还发现对照组PCNA染色度明显强于实验组。各组凋亡指数分别为对照组4.12±1.09%、顺铂组10.51±1.24%、Rg3组11.57±1.38%、顺铂+Rg3组24.96±1.74%。与对照组相比,各用药组凋亡指数均明显高于对照组(P<0.05,差异有显著性)。结论:1.Rg3和顺铂单独及二者联合应用能抑制人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长。2.Rg3应用降低肿瘤内的MVD,抑制宫颈癌肿瘤血管生成。3.Rg3与顺铂单独及二者联合应用能抑制肿瘤细胞增殖,诱导移植瘤细胞凋亡。4.Rg3可以增加顺铂对宫颈癌的药物敏感性,降低顺铂化疗的毒副作用。
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