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目的应用分子生物学技术进行NDRG3(N-myc downstream regulated gene3)基因在前列腺癌中表达和功能的研究。方法①MPSS法检测NDRG3在人体33个正常组织中的表达;②RT-PCR和Western blot技术检测NDRG3在前列腺细胞系的表达;③构建pEGFP-N2/ NDRG3荧光蛋白表达载体,研究其在前列腺细胞系内的细胞内定位;④免疫组织化学法(SABC)检测NDRG3在人体前列腺组织芯片中的表达;⑤设计针对NDRG3的siRNA,研究沉默NDRG3对CL-1细胞株生长和克隆形成的影响;⑥构建pcDNA3.1/myc- His/NDRG3真核表达载体并转染PC-3细胞株建立永久表达NDRG3的PC-3细胞株。通过体内、体外实验,研究过量表达NDRG3对PC-3细胞株的生长、迁移和裸鼠肿瘤生长的影响;⑦RT-PCR和Western blot技术检测雄激素类似物R1881对LNCaP细胞NDRG3表达的影响;⑧基因芯片技术研究PC-3细胞过表达NDRG3的表达调控基因,用生物信息学方法对结果进行分析,并应用RT-PCR进行验证;⑨建立永久表达NDRG3的WPMY-1细胞株,RT-PCR验证其表达调控基因;⑩细胞计数法研究过量表达NDRG3对美伐他汀引起前列腺癌细胞凋亡的影响。结果①MPSS显示NDRG3在人体正常的睾丸和前列腺组织中具用较高水平的表达;②在RNA和蛋白水平上证实LNCaP、CL-1、PC-3、DU145前列腺癌细胞较WPMY-1前列腺间质细胞具有较高水平的NDRG3表达;③构建了pEGFP-N2/ NDRG3绿色荧光蛋白融合表达载体,并转染PC-3、LNCaP和WPMY-1细胞,证实pEGFP-N2/ NDRG3融合蛋白主要定位在细胞质中;④免疫组化结果显示前列腺癌样本NDRG3蛋白的表达率显著高于BPH样本,并且癌组织具有明显的细胞核染色和间质细胞表达;⑤沉默NDRG3表达可以抑制CL-1前列腺癌细胞的增殖和克隆形成能力;⑥过量表达NDRG3可以促进PC-3前列腺癌细胞的增殖、迁移以及裸鼠肿瘤的生长;⑦雄激素类似物R1881可以从RNA和蛋白水平诱导LNCaP细胞的NDRG3表达;⑧获得NDRD3过表达上调和下调的基因表达谱,RT-PCR验证过表达NDRD3可以上调PC-3细胞的CXCL1、CXCL3、CXCL5和FGFBP1基因的表达;⑨WPMY-1细胞过表达NDRG3可以上调CXCL3和CXCL5基因的表达;⑩NDRG3的表达可抑制美伐他汀引起的细胞凋亡。结论NDRG3在前列腺中是一个高表达的、雄激素调控基因,其在前列腺癌样本的蛋白表达率显著高于BPH样本,体外和体内实验显示NDRG3具有促进前列腺癌细胞致癌潜能的作用,这可能与其抑制细胞调亡、参与血管发生等功能有关。