【摘 要】
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对米曲霉FS3-11产α-淀粉酶的发酵进行优化。发酵培养基单因素优化表明,最适碳源为面粉+淀粉,有机氮源为黄豆饼粉+牛肉膏,无机氮源为NaN03。通过P-B试验设计方法最终得到对产
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对米曲霉FS3-11产α-淀粉酶的发酵进行优化。发酵培养基单因素优化表明,最适碳源为面粉+淀粉,有机氮源为黄豆饼粉+牛肉膏,无机氮源为NaN03。通过P-B试验设计方法最终得到对产酶影响最显著的3个培养基成分是淀粉、牛肉膏和NaN03。通过响应面中心组合设计,得出最佳发酵配方(g/L)：面粉50、黄豆饼粉20、淀粉24.25、牛肉膏10.54、NaN036.89、K2HP043、MgS041、FeS040.01。对发酵条件优化结果表明,发酵初始pH7.0,接种量7.5%,装液量60mL(250mL三角瓶),发酵温度33.5℃,发酵周期80h,最终产酶水平为3254.60U/mL,比初始水平提高了78.98%。α-淀粉酶发酵液分别经两次硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose F.F.离子交换层析、S-200凝胶层析等纯化步骤,获得纯化后的酶液,比活力为298064.7U/mg、纯化倍数为9.29、回收率为14.35%。其经过SDS-PAGE电泳检测结果表明,为单一电泳纯,分子量为50.43KD。酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为55℃,但热稳定性较差；最适反应pH为5.5,且具有较广的pH稳定性。研究不同效应物对该酶的影响表明：1.重金属对该酶有明显的抑制作用,Ca2+却有一定的促进作用。2.不同的有机溶剂对该酶的影响不同。3.化学修饰剂NBS会对酶产生明显的抑制作用,初步判断色氨酸吲哚基可能与酶的催化活性密切相关。
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