Nrf2是细胞氧化应激反应中的重要转录因子。在正常生理状态下,细胞质中的Nrf2与Keap1结合,使自身能够持续泛素化并被蛋白酶体降解。当受到亲电试剂或ROS等氧化应激物的刺激时,Keap1与Nrf2解偶联,随后Nrf2进入细胞核,识别并结合下游基因启动子区的氧化应激元件(antioxidant response element,ARE),诱导氧化应激蛋白和Ⅱ相解毒酶的表达,这就是Keap1-Nrf2-ARE信号通路。Keap1-Nrf2-ARE信号通路在抗肿瘤、抗氧化应激、抗凋亡、抗炎症反应、抗动脉粥样硬化以及神经保护等方面,发挥着广泛的细胞保护作用。目前Keap1-Nrf2-ARE通路已经成为抗癌化学疗法的新靶点,为癌症的治疗提供一条新途径。MicroRNAs(miRNAs)是一类小分子RNAs,包含18-24个核苷酸的非编码蛋白质。它主要通过与靶mRNA的3’UTR碱基配对,导致mRNA在转录后水平上降解或者翻译终止,即在转录后水平调控基因的表达。miRNAs在细胞的增殖、分化、凋亡等过程中发挥着重要的调节作用,逐渐引起了越来越多研究者的关注。目前的研究表明,多数miRNA基因位于肿瘤形成相关性脆弱基因位点,参与肿瘤的发生发展。研究者已经证实,miRNA的异常表达与多种癌症的发生密切相关,并且作为癌基因和抑癌基因参与调控肿瘤细胞的生长、凋亡、侵袭和转移等过程。目的 本文以miR-140为研究对象,探讨了在Bel-7402肝癌细胞中miR-140对Nrf2及其下游抗氧化基因表达的作用以及潜在的抗氧化机制,为肝癌细胞的研究提供一定的理论依据。主要实验内容与结果:1、构建了稳定转染miR-140的肝癌细胞株Bel-7402;2、通过细胞划痕实验和流式细胞仪检测了 miR-140对细胞迁移和增殖的影响,结果显示,miR-140对细胞迁移没有影响,但可以抑制细胞的增殖;3、通过QPCR和western blot检测了在肝癌细胞Bel-7402中,过表达miR-140对Nrf2及其下游抗氧化基因表达的影响,结果显示,过表达miR-140能显著抑制Nrf2及其下游抗氧化基因的表达;4、在H202、t-BHQ作用下,通过QPCR、western blot以及MTS检测在肝癌细胞Bel-7402中,过表达miR-140对细胞生长以及氧化应激的影响,结果显示过表达miR-140能够抑制细胞的增殖,增加Bel-7402肝癌细胞对氧化应激的敏感性。结论 过表达miR-140能够抑制Bel-7402肝癌细胞的增殖,抑制Nrf2及其下游抗氧化基因的表达,增强Bel-7402肝癌细胞对氧化应激的敏感性。